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重组人生长激素体外激活人结肠癌细胞JAK2-STAT3通路
目的 探讨重组人生长激素(rhGH)对不同生长激素受体(GHR)表达状态的人结肠癌细胞生长及JAK2-STAT3通路的影响.方法 采用流式细胞术根据GHR表达状态不同筛选结肠癌细胞株,选择LOVO细胞株和HCT-8细胞株进入实验,采用MTT法分析rhGH对人结肠癌细胞生长的作用,采用流式细胞术进行细胞增殖指数(PI)、细胞周期分析及凋亡检测,采用蛋白质印迹法分析JAK2-STAT3通路相关分子的蛋白水平变化.结果 HCT-8细胞株GHR呈阳性表达(59.6％),LOVO细胞株GHR呈阴性表达(3.5％).rhGH显著促进HCT-8细胞生长,G2/M期比例明显高于未处理组(P=0.0073),PI升高,凋亡率降低,且pJAK2、pSTAT3、VEGF、CyclinD1、Bcl-xL蛋白表达增加.经rhGH处理后,LOVO细胞的上述各项检测指标未出现明显变化.结论 rhGH促进GHR表达较高的HCT-8细胞生长,上调JAK2 -STAT3信号转导通路多个关键节点的基因表达；不促进GHR低表达的LOVO细胞生长及JAK2-STAT3通路因子表达变化.
关键词： 重组人生长激素 生长激素受体 结肠癌 JAK2-STAT3通路 -
K-受体激动剂对体外循环大鼠JAK2-STAT3信号通路及认知功能影响
目的 探讨K-受体激动剂U50488H对体外循环(CPB)术后大鼠JAK2-STAT3信号通路及认知功能的影响.方法 选取60只SD大鼠为研究对象,随机分为假手术组(S组)、CPB组(C组)、U50488H组(K组),U50488H拮抗剂组(NK组),U50488H+AG490组(AG组),每组各12只.各组大鼠于CPB后1 d行水迷宫检测;酶联免疫吸附试验检测血清中炎症因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及S-100β蛋白的变化.蛋白印记法检测海马JAK2、STAT3及磷酸化JAK2、STAT3表达水平变化.结果 C组、K组、NK组及AG组S100-β、IL-6、TNF-α水平均显著高于S组(P<0.05).K组、AG组S100-β、IL-6、TNF-α水平均显著低于C组(P<0.05).C组、K组、NK组及AG组海马组织JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3水平均显著高于S组(P<0.05).K组、AG组JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3水平均显著低于C组(P<0.05).与C组比较,K组和AG组大鼠平均逃避潜伏期时间明显缩短,空间探索试验中进入目标象限的次数明显增多(P<0.05).结论 K-受体激动剂可在一定程度上减少CPB术后认知功能障碍发生,其机制可能与抑制JAK2-STAT3通路,减少炎症反应有关.
关键词： K-受体激动剂 体外循环 认知功能 JAK2-STAT3通路 -
JAK2-STAT3通路对七氟烷后处理在体大鼠缺血/再灌注心肌的影响
目的 探讨Janu激酶/信号转导子和转录激活子(Janus kinase/signal transducer and activator of transcriptio,JAK2/STAT3)通路对吸入七氟烷后处理的在体大鼠缺血/再灌注心肌的保护作用和影响.方法 75只成年健康♂ SD大鼠,体质量250～300 g,随机分为5组(n=15):假手术组(S)、缺血/再灌注组(CON)、AG-490组(AG)、七氟烷后处理组(Sev-p)、七氟烷后处理+AG490组(AG+Sev-p).采用结扎左冠状动脉前降支30 min、再灌注120 min的方法制备心肌缺血/再灌注模型.假手术组左冠状动脉前降支穿线并不阻断冠状动脉,AG-490组在再灌前10 min静注JAK2抑制剂AG-490(3mg·kg-1),七氟烷后处理组在再灌注前2 min开始吸入2 8%七氟烷,持续5 min,七氟烷后处理+AG490组于再灌前10 min静注JAK-STAT通道阻断剂AG-490(3 mg·kg-1),再行七氟烷后处理.各组均以5 ml·kg-1·h-1的速率静脉输注生理盐水维持至术毕.记录心率(HR)、平均动脉压(MAP),计算心率和收缩压乘积(RPP).各组随机取10只于再灌120 min后处死大鼠,TTC法测定心肌梗死面积(IS/AAR).各组另5只大鼠,于再灌注开始后的10 min处死,取出左心室心肌组织,提取总蛋白,用Western blot法分析心肌JAK2和磷酸化JAK2及心肌STAT3和磷酸化STAT3的蛋白表达变化.结果 与其它组比较,Sev-p组和Sev-p+AG490组在后处理5 min时,MAP、HR和RPP均明显下降(P<0.05),但经历10 min洗脱期后,各指标变化趋向一致,组间比较差异无统计学意义.与CON组和AG+Sev-p组比较,Sev-p组的梗死面积明显减少,差异有统计学意义(P<0.05).AG-490组与CON组比较心梗面积差异无显著性(P>0.05).Western blot检测发现,Sev-p组再灌注后10 min JAK2、STAT3的磷酸化水平明显升高,与其它组相比差异有统计学意义,AG+Sev-p组与Sev-p组相比,其JAK2、STAT3的磷酸化水平较低,差异有统计学意义.结论 七氟烷后处理对缺血/再灌注损伤的大鼠心肌有较好的保护作用,该作用与 JAK2-STAT3通路的激活有关.
关键词： 七氟烷 后处理 心肌缺血/再灌注损伤 梗死面积 JAK2-STAT3通路 保护作用 -
JAK2-STAT3通路和E-cadherin在结直肠癌进展中的相互作用分析
目的:探讨JAK2-STAT3通路和E-cadherin在结直肠癌进展中的相互作用.方法:选取择期行手术治疗的结直肠癌患者87例,利用Western blot检测结直肠癌及癌旁组织中STAT3、p-STAT3和E-cadherin蛋白的表达,并计算p-STAT3/STAT3值.结果:结直肠癌组织中STAT3、p-STAT3蛋白相对表达量和p-STAT3/STAT3值均高于癌旁组织,而E-cadherin蛋白相对表达量则低于癌旁组织,差异具有统计学意义(P＜0.05);结直肠癌患者STAT3、p-STAT3和E-cadherin蛋白表达均与肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、浸润深度和TNM分期有关(P＜0 05);Pearson相关分析显示,结直肠癌组织中STAT3表达与p-STAT3呈正相关(r=0.736,P＜0.05),而与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.497,P＜0.05),p-STAT3表达与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.642,P＜0.05).结论:STAT3和p-STAT3蛋白在结直肠癌组织中表达上调,可能通过激活JAK2-STAT3通路抑制E-cadherin蛋白表达而实现对肿瘤细胞浸润、转移的调控作用.
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姜黄素对瘦素刺激HSC增殖及JAK2-STAT3信号通路影响的研究
目的:观察姜黄素对瘦素刺激肝星状细胞(HSC)增殖及对JAK2-STAT3信号通路的影响.方法:SD大鼠36只灌胃姜黄素煎剂7d,制备各药物含药血清,用噻唑蓝(MTT)比色法检测药物血清对100 pg·L-1的瘦素刺激HSC-T6增殖的影响;应用蛋白印迹试验检测姜黄素散对100 pg·L-1瘦素刺激HSC-T6中JAK2、STAT3蛋白的表达水平.结果:姜黄素药物血清有抑制HSC-T6的作用(P＜0.05或P＜0.01));姜黄素作用6h后,JAK2、STAT3蛋白的表达水平开始出现降低,且JAK2降低较为明显,24h后STAT3降低为明显.结论:姜黄素药物血清具有抑制瘦素刺激HSC-T6增殖的作用;而JAK2-STAT3通路被阻断,JAK2-STAT3蛋白表达的降低可能是其发生的主要机制之一.
关键词： 姜黄素 肝星状细胞 JAK2-STAT3通路 大鼠 -
活性氧簇在心肌缺血后处理抗细胞凋亡中的作用及其机制
目的 观察活性氧簇(ROS)在缺血后处理抗心肌细胞凋亡机制中的作用,探讨ROS在缺血后处理机制中对酪氨酸激酶2(JAK2)-信号传导与转录激活因子3(STAT3)通路的影响.方法 将健康雄性成年Wistar大鼠(体质量240～280g)随机分为假手术组、缺血再灌注损伤组、缺血后处理组及缺血后处理+N-(2-巯基丙酰基)-甘氨酸(MPG)组.TUNEL法检测心肌细胞凋亡比率;免疫组织化学法检测bcl-2及bcl-xL蛋白水平;Western blot法检测磷酸化STAT3水平.结果 与缺血再灌注损伤组比较,缺血后处理显著上调再灌注后bcl-2(42.4±5.6比8.6±2.4,P＜0.05)及bcl-xL(19.9±3.2比9.6±2.5,P＜0.05)水平,抑制再灌注后心肌细胞凋亡(37.8±4.0比56.9±6.0,P＜0.05).缺血后处理+MPG组较缺血后处理组bcl-2(10.5±2.1比42.4±5.6,P＜0.05)及bcl-xL(9.9±2.3比19.9±3.2,P＜0.05)水平显著降低,心肌细胞凋亡比率显著升高(55.7±7.7比37.8±4.0,P＜0.05).缺血后处理显著上调再灌注后磷酸化STAT3水平(0.27±0.02比0.43±0.08,P＜0.05).缺血后处理前使用MPG显著降低STAT3磷酸化水平(0.27±0.04比0.43±0.08,P＜0.05),抑制JAK2-STAT3通路活性.结论 ROS在缺血后处理抗心肌细胞凋亡作用中具有重要作用.缺血后处理可能通过氧化还原信号激活JAK2-STAT3通路,并进一步调节STAT3下游bcl家族抗凋亡蛋白表达水平而发挥抗凋亡作用.
关键词： 心肌缺血 再灌注损伤 缺血后处理 JAK2-STAT3通路 -
JAK2-STAT3信号通路在缺血性疾病的研究进展
JAK2-STAT3信号途径是参与机体的分化、侵袭、代谢、血管再生的重要信号途径,多种因子及药物可通过激活此通路促进血管内皮细胞新生,改善缺血,而广泛用于基础实验及缺血性疾病的研究,本文将综述近年来JAK2-STAT3信号途径在心、脑、外周血管及其他缺血性疾病等方面进行的研究.
关键词： JAK2-STAT3通路 血管再生 缺血性疾病 -
重组人生长激素对GHR差异表达人胃癌细胞移植瘤生长的影响
目的 运用小分子干扰GHR(siGHR)技术获取生长激素受体(GHR)基因差异表达的人胃癌MGC803细胞株,探讨rhGH干预GHR不同表达状态细胞株植入裸鼠体内的移植瘤生长情况及JAK2/STAT3通路关键节点基因表达变化.方法 Western-Blot法鉴定亲本及转染后细胞株GHR表达状态,72只接种皮下移植瘤的裸鼠随机分为:对照组(生理盐水0.2ml/d),低剂量rhGH组(1U/(kg.d))和高剂量rhGH组(3U/(kg.d)),连续给药21d,观察并记录裸鼠体质量和肿瘤体积,免疫组织化学法检测胃癌组织中VEGF蛋白表达,Western-Blot法测JAK2-STAT3通路节点蛋白变化.结果 转染空载体细胞株GHR蛋白表达量与亲本细胞株差异不明显(P＞0.05),转染干扰载体株较亲本细胞株GHR蛋白下降57％.对于接种亲本及空载质粒转染的人胃癌细胞株MGC803的裸鼠,rhGH给药组皮下移植瘤体积较对照组增大(P＜0.05),且rhGH组促增长效应显著(P＜0.05),3组间体重差异不明显(P＞0.05); VEGF蛋白表达较对照组升高,JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3含量增加;对于GHR表达下调的人胃癌细胞株MGC803的裸鼠,给药组体重大于对照组(P＜0.05),而3组之间肿瘤体积大小、VEGF蛋白表达水平及JAK2/STAT3通路重要节点蛋白含量比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 rhGH能促进GHR阳性表达的MGC803移植瘤生长,但对经siGHR技术抑制GHR基因表达的MGC803移植瘤未表现出促肿瘤生长效应,其机制可能与血清VEGF分泌及JAK2-STAT3信号转导通路节点基因功效有关.
关键词： 重组人生长激素 生长激素受体 胃癌 血管内皮生长因子 JAK2-STAT3通路
