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Sysmex XE2100血细胞分析仪与流式细胞检测抗体生成细胞的相关性
目的:通过对自身免疫性溶血性贫血(autoimmune hemolytic anemia,AIHA)患者抗体生成细胞(antibody secreting cell,ASC)的检测,分析Sysmex XE2100分析仪与流式细胞仪的相关性及散点图的分布特征.方法:检测65例AIHA患者外周血白细胞并绘制SSC-SFL通道散点图;BD FACScalibur流式细胞仪检测ASC;显微镜分类计数200个白细胞中的ASC作为终判定依据.结果:>9个ASC/200WBC,流式细胞仪检测＞350个/μl,XE2100为Ⅲ级分布;1～6个ASC/200WBC,流式细胞仪检测100～300个/μl,XE2100为Ⅱ级分布;而在XE2100为Ⅰ级分布时,显微镜检查为阴性,流式细胞仪检测50个/μl左右.结论:检测ASC,流式细胞仪结果为佳,而XE2100虽然不能准确定量,但其高速高可信度的分布图像是临床应用的重要补充.
关键词： 血细胞计数/仪器和设备 抗体生成细胞 -
β淋巴细胞功能的检测
β淋巴细胞当接受抗原刺激后,在巨噬细胞和T淋巴细胞的协同作用下,发生活化、增殖、分化成浆细胞,合成并分泌免疫球蛋白,进入血流或组织液中,使机体产生对相应抗原的体液免疫反应.检测体液免疫功能的常用方法有下列几种[1-3],现简介如下.
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噪声对小鼠抗体形成细胞的影响
为了研究噪声对抗体形成细胞的影响,模拟了生产环境的强度特点,将实验动物(小鼠)随机分为噪声强度依次是 105 dB(A)、90 dB(A)、75 dB(A) 3 个实验组和正常对照组.实验组动物每日在隔声室中接受噪声暴露 8 h,每周 6 d,连续 8 w.噪声暴露后,3 个实验组小鼠脾脏重量均较高,但仅 90 dB(A) 组有显著性;胸腺重量亦仅 90 dB(A) 组有显著变化.各噪声暴露组抗体形成细胞分泌抗体的能力均显著降低(P＜0.01和P＜0.05).提示:噪声暴露对体液免疫有一定的抑制作用.
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利用单个细胞RT-PCR法克隆全人源性HBV单克隆抗体的探讨
目的 建立外周血单个抗体分泌细胞分离和单个细胞RT-PCR系统,高效快速克隆高度特异性、全人源性的HBV单克隆抗体.方法 选择3例HBV感染恢复期患者,从外周血中富集B淋巴细胞,加入HBcAg Peptide pool活化B淋巴细胞,流式分选出记忆性抗体分泌细胞(CD19+ CD10-IgG+ CD27+),通过有限稀释法获得单个细胞,单细胞RT-PCR反转出cDNA,巢式PCR扩增抗体重链恒定区序列片段,将PCR产物纯化并克隆至pEASY(R)-T1 simple克隆载体,进行测序鉴定.结果 ELISA结果显示,3例HBV感染恢复期患者血浆中均检测到较高水平IgG,与健康志愿者相比,差异均有统计学意义(P值均＜0.05).流式结果显示,B淋巴细胞比例均高于94％,且均可分离出记忆性抗体分泌细胞.从分离的抗体分泌细胞中挑选出24个含有1个形态完好的细胞,经鉴定,其中有14个扩增成功,且条带在200 bp左右,与预期片段大小相符.对抗体重链序列分析显示成功扩增出抗体恒定区片段.结论 成功构建了单个抗体分泌细胞分离和单个细胞RT-PCR系统,获得了抗体重链序列,为后期全人源性乙型肝炎单克隆抗体的高通量生产打下了坚实的基础.
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松黄颗粒对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清及其抗体生成细胞的影响
目的探讨松黄颗粒对实验小鼠免疫功能的影响.方法将100只昆明种小鼠分为2组,一组作碳廓清实验,另一组作抗体生成细胞检测.每组小鼠又随机分为5组:生理盐水组,松黄颗粒低、中、高剂量组和紫锥菊胶囊组.①碳廓清实验方法:在小鼠尾静脉注射印度墨汁,取血,加入到Na2CO3溶液中,摇匀,用分光光度计比色测光密度值(OD).将小鼠处死,取肝、脾,称质量,计算吞噬指数;②抗体生成细胞检测:在鼠腹腔注射压积绵羊红细胞(SRBC)细胞悬液,4 d后处死小鼠,取脾制成细胞悬液,用溶血空斑法计数溶血空斑数.结果松黄颗粒高剂量组、中剂量组分别与生理盐水组比较,吞噬指数(a)明显提高,差异具有统计学意义(P＜0.05);松黄颗粒中、高剂量组小鼠抗体生成细胞数明显高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).松黄颗粒各剂量组与紫锥菊组比较,吞噬指数(a)与抗体生成细胞数差异无统计学意义(P＞0.05).结论松黄颗粒能通过提高小鼠单核-巨噬细胞碳廓清的能力与抗体生成细胞数,提高实验小鼠免疫功能.松黄颗粒与紫锥菊胶囊比较,无明显量效差异.
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龟鹿口服液对小鼠免疫功能影响的实验研究
目的了解龟鹿口服液对小鼠免疫功能的影响.方法采用雌性昆明种小鼠经口连续给予2.5、5.0、15.0 ml/kg·bw的龟鹿口服液30 d,进行迟发型变态反应(足跖厚度增加法)、小鼠脾淋巴细胞转化试验、溶血素滴度测定、抗体生成细胞检测等试验.结果受试物对小鼠的体重、脾脏和胸腺重量无明显影响(P＞0.05);对小鼠迟发型变态反应试验中,各剂量组足跖增厚值均高于对照组;对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验,低剂量组吸光度差值高于对照组;对受试动物血清溶血素抗体滴度水平的影响,中、高剂量组的抗体积数高于对照组;对受试动物脾细胞抗体生成水平的影响,各剂量组的脾细胞抗体生成水平(空斑数)均高于对照组,差异均有显著性(均P<0.05).对小鼠碳廓清吞噬功能和对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞吞噬功能以及NK细胞活性测定中,各剂量组与对照组比较,差异均无显著性(均P＞0.05).结论龟鹿口服液具有增强小鼠细胞和体液免疫功能的作用.
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灵芝多糖对小鼠体液免疫功能的影响
目的:研究灵芝多糖(GLB7)对小鼠特异性体液免疫功能调节的影响.方法:实验小鼠分成4组,分别经胃灌注不同剂量灵芝多糖,每天1次,连续14 d,对照组小鼠用等量蒸馏水代替.在实验第10、24 d用羊红细胞(SRBC)免疫小鼠,分别于免疫后第5 d进行抗体生成细胞(AFC)检测和血清抗SRBC抗体凝集效价测定.结果:灵芝多糖喂药后2周,高、中、低3个剂量组小鼠抗体生成细胞以及高剂量组小鼠血清溶血素(抗体积数)与对照组比较均有显著性差异(P＜0.01;P＜0.05);喂药后4周,高、中、低3个剂量组小鼠抗体生成细胞以及小鼠血清溶血素(抗体积数)与对照组比较均无显著性差异(P＞0.05).结论:灵芝多糖能提高小鼠的B细胞产生特异性抗体的能力.
