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脂膜微泡结合凝血酶原复合物的制备
目的: 制备结合凝血酶原复合物(PCC)的阴离子脂膜微泡,评价微泡的理化性质.材料和方法: 采用机械振荡直接连接法,分两组(于机械振荡之前或之后加入),制备结合PCC的阴离子脂膜微泡,观察并检测洗涤前后微泡的理化性质.结果: 微泡与PCC的结合率及Ⅸ因子活性: 两组间比较无明显差异(P》0.05),但洗涤后结合率由洗涤前的95%降为80%,活性由90%降为19%.结论: 直接连接法可制备结合PCC的阴离子脂膜微泡,微泡与PCC结合率较高,且洗涤前能保持Ⅸ因子较高的活性.
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2种方法制备靶向超声微泡对卵巢肿瘤新生血管评价的意义
目的:比较使用直接连接法和生物素-亲和素桥连接法制备携血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)单抗的靶向超声微泡(MBt)对裸鼠卵巢癌移植瘤新生血管的超声显像特点及应用价值。方法建立卵巢癌细胞株SKOV3裸鼠皮下移植瘤模型;使用直接连接法和生物素-亲和素桥连接法分别制备 MBt;将18只裸鼠随机分为两组,先分别注射2种方法制备的 MBt,对2种方法制备的 MBt 进行比较。间隔60 min 之后,再将18只裸鼠注射MBc,对各组内 MBt 与 MBc 进行比较。分别观察2种制备方法的 MBt 及各组内 MBt 与 MBc 的裸鼠卵巢癌移植瘤新生血管的造影特征,并分析时间强度曲线(TIC)相关参数;采用免疫组织化学检测肿瘤组织新生血管 VEGFR2的表达。结果2种方法均成功制备携 VEGFR2单抗的 MBt;生物素-亲和素桥连接法制备的 MBt 峰值强度较直接连接法制备的 MBt 峰值高(P <0.05),且持续时间更长(P <0.05);各组组内 MBt 峰值强度均较 MBc 高(P<0.05),持续时间均更长(P <0.05);免疫组织化学显示:裸鼠肿瘤组织内大量条索状棕黄色 VEGFR2阳性表达。结论直接连接法和生物素-亲和素桥连接法制备的携 VEGFR2单抗 MBt 均能实现靶向分子超声显像。但在临床诊断卵巢肿瘤超声显像及微泡稳定性方面,生物素-亲和素桥连接法效果优于直接连接法。