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替比夫定对慢性乙型肝炎患者TCR CDR3谱型的影响
目的:利用T细胞受体谱型分析技术(即TCR CDR3谱型分析技术),对替比夫定治疗慢性乙型病毒性肝炎患者的细胞免疫状况进行研究。方法选取新乡医学院第一附属医院2011年8月至2012年12月服用替比夫定抗病毒治疗的慢性乙肝患者作为研究对象,采集服药前后外周血,以健康献血员作对照,同期检测治疗前后乙型肝炎病毒(HBV DNA)学指标、血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)等肝功能指标;进行乙肝五项定量测定;采用密度梯度离心法分离出外周血单核细胞(PBMC),细胞分离,采用TRIZOL试剂提取RNA,互补DNA(cDNA)的合成,PCR扩增,GeneScan扫描分析TCR CDR3谱形。结果15例患者HBV-DNA定量、乙肝表面抗原(HBsAg)滴度、乙肝e抗原(HBeAg)滴度、ALT、AST指标在治疗6个月后均明显下降。抗病毒治疗6个月时血清HBsAg滴度和HBeAg滴度下降幅度与HBV-DNA下降水平之间有明显直线相关关系。完成10例患者T细胞受体CDR3谱型分析,替比夫定治疗后TCR CDR3出现异常谱型的家族总数显示差异无统计学意义,但具体每例患者,24个BV家族中均有发生谱型改变现象,对于某一 BV 家族在不同患者中也有发现变化的情况,提示细胞免疫可能参与了其病变过程。结论替比夫定可能影响机体免疫系统。
关键词: 替比夫定 肝炎 乙型 慢性 TCR CDR3谱型 免疫扫描谱型分析技术