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  • 结直肠癌患者血浆SEPT9基因甲基化检测的研究

    作者:堵一乔;胡婷婷;王文惠;徐刚;关明;杨振华

    目的 探讨血浆Septin 9(SEPT9)基因甲基化检测对结直肠癌的临床意义.方法 回顾性研究.2016至2017年复旦大学附属华山医院选择研究对象分为结直肠癌组(结肠癌65例,直肠癌19例)、癌前病变组(结直肠腺瘤50例)和对照组(20名健康体检者).采用荧光PCR法检测外周血浆SEPT9基因甲基化状态.统计学方法采用卡方检验.结果 结直肠癌组患者SEPT9基因甲基化阳性率为63.1%(53/84例),显著高于癌前病变组10%(5/50例)(χ2=35.993,P=0.000),对照组中未检出.SEPT9基因甲基化检测的敏感度为63.1%(53/84例),联合癌胚抗原(CEA)检测的敏感度为75%(63/84例).ROC曲线分析,SEPT9基因甲基化检测AUC为0.828,高于CEA检测结果(0.795).SEPT9基因甲基化在结直肠癌Ⅰ~Ⅱ期和Ⅲ~Ⅳ期患者检测阳性率分别为51.4%(19/37例)和72.3%(34/47例)(χ2=3.917,P=0.048),与患者年龄、性别和癌变部位无关.结论 血浆SEPT9基因甲基化检测可能有助于结直肠癌早期诊断,且与结直肠癌进展有关.

  • 卵巢上皮性癌患者外周血中septin-9和clusterin蛋白的表达及其意义

    作者:吕讷男;姚洪文;肖汀;高燕宁;吴令英

    目的:检测卵巢上皮性癌(卵巢癌)患者外周血中septin-9、clusterin蛋白的表达,并探讨其临床意义。方法收集2008年1月29日至2010年2月1日间中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院收治的200例患者的临床病理资料,其中137例卵巢癌(卵巢癌组)、12例卵巢交界性上皮性肿瘤(交界性肿瘤组)、10例卵巢良性上皮性肿瘤(良性肿瘤组)、41例盆腔良性病变(盆腔良性病变组),以同期进行健康体检的58例健康妇女作为对照组,采用双抗体夹心法ELISA和ELISA法分别检测各组患者血浆中septin-9、clusterin蛋白的表达;分析血浆中septin-9、clusterin蛋白表达的临床意义;并以受试者工作特征(ROC)曲线的曲线下面积(AUC)评估血浆中septin-9、clusterin蛋白检测对卵巢癌的诊断效能。结果双抗体夹心法ELISA法检测显示,卵巢癌组和盆腔良性病变组患者外周血中septin-9蛋白表达水平(A值分别为0.35±0.09、0.36±0.09)明显高于对照组(A值为0.31±0.12,P<0.01);而交界性肿瘤组、良性肿瘤组(A值分别为0.30±0.04、0.33±0.04)分别与对照组比较,差异则无统计学意义(P>0.05)。卵巢癌患者外周血中septin-9蛋白表达水平与有无肿瘤家族史(A值分别为0.38±0.10、0.34±0.08)和远处转移(A值分别为0.37±0.10、0.34±0.08)有关(P<0.05),而与年龄、手术病理分期、病理分化程度以及有无吸烟史、治疗史(包括手术、放化疗)和淋巴结转移均无关(P>0.05)。ELISA法检测显示,卵巢癌组患者外周血中clusterin蛋白表达水平明显高于对照组[分别为(109±52)、(103±18)pg/L,P=0.021];而交界性肿瘤组、良性肿瘤组、盆腔良性病变组[分别为(88±41)、(91±23)、(94±29)pg/L]分别与对照组比较,差异则均无统计学意义(P>0.05)。卵巢癌患者外周血中clusterin蛋白表达水平与上述临床病理指标均无关(P>0.05)。以血浆中septin-9蛋白表达水平区分卵巢癌患者和健康体检妇女时,其AUC为0.712,当ROC曲线的界值定为0.28时,septin-9蛋白表达水平诊断卵巢癌的敏感度为82.5%,特异度为50.0%;以血浆中clusterin蛋白表达水平区分卵巢癌患者和健康体检妇女时,其AUC为0.636,当ROC曲线的界值定为87.96 pg/L时,clusterin蛋白表达水平诊断卵巢癌的敏感度为71.5%,特异度为41.4%。结论卵巢癌患者外周血中septin-9和clusterin蛋白高表达,且卵巢癌有远处转移患者外周血中septin-9蛋白表达更高;血浆中septin-9和clusterin蛋白检测对卵巢癌的诊断有一定的价值,表明septin-9和clusterin蛋白可能是潜在的卵巢癌患者的血浆标志物。

  • Septin2在霍奇金淋巴瘤细胞株L428细胞中的表达及其在促进细胞再分化中的作用

    作者:孙清灿;钟琳;丘波;赵彤;周新华

    目的 探索GTP结合蛋白氯苄乙胺2(Septin2)在霍奇金淋巴瘤细胞株L428细胞中的表达及其在H/RS(Hodgkin/Reed-Sternberg)细胞向B细胞再分化中的作用.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western blot、激光共聚焦显微镜、免疫细胞化学法检测霍奇金淋巴瘤细胞株L428细胞过表达CD99前后Septin2在mRNA和蛋白水平的表达;采用RT-qPCR和Western blot检测L428细胞转染Septin2干扰片段(Septin2-siRNA)后Septin2的表达;采用激光共聚焦显微镜、CCK8法和流式细胞术检测干扰Septin2基因对L428细胞骨架蛋白、细胞增殖活性和免疫表型的影响.结果 与L428细胞空白对照组比较,L428细胞Septin2 mRNA表达水平在CD99过表达后(0.329±0.019对1.000,P=0.001)和转染Septin2-siRNA后(0.276±0.025对1.000,P=0.000)均下降,蛋白表达水平也下降.与转染空载体组比较,转染Septin2-siRNA后的L428细胞较前者胞体缩小,细胞增殖活性下降(F=204.927,P<0.001),细胞中的微丝骨架发生了重建,CD30和CD15表达下降,CD19、CD10、CD38表达增高.结论 Septin2在L428细胞中高表达,干扰Septin2可促进H/RS细胞向B细胞方向再分化.

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