首页 > 文献资料
-
乳腺癌细胞缺氧微环境中癌胚抗原的表达及其对预后的判断意义
目的：探究癌胚抗原（ CEA）表达水平与乳腺癌缺氧微环境的关系及其预后价值。方法横断面调查。在缺氧和常氧条件下培养乳腺癌细胞 MDA-MB-231，采用蛋白免疫印迹法（ Western blotting）检测其CEA的表达变化；收集天津医科大学肿瘤医院2013年4月至2015年6月30例乳腺浸润性癌标本，采用免疫组织化学染色法检测乳腺癌病理组织中CEA﹑缺氧诱导因子-1α（ HIF-1α）和碳酸酐酶-9（ CA-9）的表达水平；收集我院2009年4月至2011年6月166例乳腺癌患者术前血清，采用电化学发光法检测血清CEA水平，同时采用Logistic单因素分析法研究患者临床资料与CEA水平的相关性；采用Kaplan-Meier法计算乳腺癌患者无进展生存期，Log-rank法比较组间差异。结果乳腺癌细胞缺氧条件下CEA蛋白水平明显高于常氧条件，且CEA蛋白水平随着缺氧时间的延长而升高；乳腺癌病理组织免疫组织化学染色结果显示，HIF-1α表达区域可见CEA高表达， CEA与CA-9在同一区域共同表达，线性回归法分析发现CEA表达水平与HIF-1α（ P＝0.0096）的表达水平具有相关性；术前升高的血清CEA水平与患者肿瘤长径大小密切相关（ P＝0.015）﹑淋巴结转移密切相关（ P＝0.032）；乳腺癌患者CEA阳性组和CEA阴性组无进展生存期分别为29.85个月和39.08个月，差异有统计学意义（ P＝0.003）。结论 CEA在乳腺癌缺氧微环境中表达上调，血清CEA水平可以作为乳腺癌患者预后的评价指标。
-
缺氧对人肝癌SMMC-7721细胞HIF-1α和DEC1表达影响及机制分析
目的:探讨缺氧对人肝癌SMMC-7721细胞中缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和分化型胚胎软骨发育基因1(differentiated embryo-chondrocyte expressed gene 1,DEC1)表达的影响,并分析其机制,为肝癌的缺氧调节提供理论依据.方法:以肝癌SMMC-7721细胞为实验材料,应用二氯化钴(CoCl2)建立体外缺氧模型,对SMMC-7721细胞进行不同时间的缺氧培养(0、2、4、6、24和48 h).RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测缺氧不同时相HIF-1α和DEC1 mRNA及蛋白质的表达变化.HIF-1α和DEC1蛋白表达的相关性采用Pearson等级相关性分析.应用HIF-1α蛋白抑制剂YC-1对SMMC-7721细胞进行HIF-1α抑制培养,并设立缺氧对照组和常氧对照组,观察抑制HIF-1α对DEC1表达影响.结果:常氧培养时,肝癌细胞中HIF-1α和DEC1 mRNA和蛋白表达明显高于肝细胞.随缺氧时间延长,HIF-1α蛋白、DEC1 mRNA及DEC1蛋白表达均明显增加,F值分别为183.13、127.78及84.22,P值均＜0.01;但HIF-1α mRNA表达无明显变化,F=0.960,P＞0.05.其中HIF-1α蛋白、DEC1 mRNA及DEC1蛋白均在缺氧4h达到高峰,相对表达量分别为1.183±0.063、2.182±0.234及0.839±0.051,与常氧对照组相比较,差异均有统计学意义,P值均＜0.001.Pearson相关性分析结果显示,HIF-1α蛋白与DEC1蛋白表达呈高度正相关,r=0.826,P＜0.05.YC-1抑制培养时,HIF-1α蛋白、DEC1 mRNA及DEC1蛋白均较缺氧对照组明显降低,相对表达量分别为0.507±0.028、0.702±0.044及0.676±0.067,F值分别为428.12、730.24和371.69,P值均＜0.01;但HIF-1α mRNA表达无明显变化,F=0.757,P＞0.05.结论:干扰或抑制肝癌SMMC-7721细胞中HIF-1α蛋白的表达,能够降低缺氧诱导的DEC1高表达,为肝癌的缺氧调节和临床治疗提供理论依据.
-
超声靶向破坏载氧微泡技术对缺氧微环境下胆管癌细胞生长影响
目的 胆管癌细胞在缺氧微环境中能够快速增殖、侵袭和转移,超声靶向破坏微泡技术改变了肿瘤缺氧微环境.本研究旨在探讨超声靶向破坏载氧微泡技术对缺氧微环境下胆管癌细胞增殖、凋亡的影响.方法 以DSPC+DPPE-MPEG 5000为外壳,通过机械振荡法制作载氧微泡,运用氯化钴(CoCl2)模拟缺氧微环境.体外培养胆管癌细胞株QBC939和RBE,通过超声靶向破坏载氧微泡技术改变胆管癌生存的缺氧微环境,噻唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞的生长情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期.结果通过DSPC+DPPE5000的机械振荡法能够制作出平均粒径为1.91μm和载氧浓度为(2.57±0.82)×10-3 mg/mL的载氧微泡,QBC939和RBE细胞在CoCl2模拟缺氧微环境中能够快速生长,QBC939细胞对照组和CoCl2组A值分别为1.91±0.07和1.67±0.04,t=-7.855,P=0.0014;RBE细胞对照组和CoCl2组A值分别为2.81±0.04和1.84±0.04,t=-30.514,P=0.0001,差异均有统计学意义.但相比于缺氧组细胞,实验组胆管癌细胞生长明显受到抑制(均P<0.05),凋亡率上升(均P<0.05),且具有剂量依赖性.细胞周期分析缺氧组S期细胞比例明显升高,增殖指数PI明显升高,差异具有统计学意义(均P<0.05),但缺氧组与微泡组间差异无统计学意义.结论胆管癌细胞能够在缺氧微环境下快速生长,而超声靶向破坏载氧微泡能够纠正细胞的缺氧微环境,促进细胞凋亡,抑制胆管癌细胞增殖,但该作用不依赖于细胞周期的调控.
-
缺氧在口腔癌发生发展及治疗中的作用
实体肿瘤普遍存在缺氧微环境,缺氧与肿痛的发生发展以及治疗密切相关.对这一领域的研究目前已成为寻找癌症新治疗方法的热点.本文就缺氧与口腔癌细胞的增殖、凋亡,血管的生成、侵袭转移以及放、化疗的相关性进行综述.
-
缺氧微环境下缺氧诱导因子-1α对前列腺癌细胞上皮间质转化的影响
目的：探讨缺氧诱导因子-1α在缺氧的条件下对前列腺癌细胞发生上皮间质转化的影响。方法在缺氧的环境中培养前列腺癌细胞 PC3,并应用分子生物学的方法检测其是否是发生上皮间质转化的关键转录因子。结果缺氧微环境可以诱导前列腺癌细胞 PC3发生上皮间质转化,缺氧诱导因子-1α起关键的调节作用,并且可以增强前列腺癌细胞的侵袭能力。缺氧条件下抑制缺氧诱导因子-1α的表达可以阻止前列腺癌细胞发生上皮间质转化。结论缺氧微环境通过缺氧诱导因子-1α诱导前列腺癌细胞 PC3发生上皮间质转化。
-
缺氧微环境与肿瘤的关系
肿瘤正严重威胁着人类的健康和生命。在我国，癌症正超过心脑血管病成为致死原因的第一位。Gray 等在1953年发现富氧肿瘤细胞比缺氧肿瘤细胞对放疗的敏感性高3倍，这提示肿瘤生物学特性与缺氧微环境可能有一定的相关性［1］。肿瘤的特性之一是快速生长。随着肿瘤细胞的快速生长使得肿瘤细胞数量增多，体积增大，其内部的血液供应不足，尤其是中心部位由于血管供血的相应不足，逐渐导致肿瘤内部氧的供应和消耗发生失衡。研究发现，一定程度或一定区域的缺氧在肿瘤内部都是显著存在的。缺氧是大多数实体肿瘤的特征之一，缺氧微环境也是实体肿瘤微环境中的重要特征之一，在肿瘤的发生、发展中起重要作用［2］。局部微环境的缺氧可促进肿瘤细胞的增殖、浸润和转移、凋亡等恶性生物学行为的发生。新近研究已证实，肿瘤对缺氧微环境的适应并不仅仅是为了维持肿瘤的生存和生长，因此对缺氧微环境的深入研究可进一步了解肿瘤的生长特性，对肿瘤的诊断、治疗及预后都有着极其重要的意义。肿瘤缺氧微环境与肿瘤的发生、发展、转移和治疗及预后的研究已成为探索癌症新治疗方法的热点［3-4］。本文对近年来在肿瘤缺氧微环境的研究进展综述如下。
-
从痰论治胃癌缺氧微环境逆转细胞上皮间质转化理论探析
肿瘤缺氧微环境能诱导肿瘤细胞上皮间质转化(EMT),进一步发生侵袭转移.中医认为,肿瘤的发生发展与“痰”关系密切.结合临床与基础研究,创新“胃癌痰证理论”,进一步提出其核心观点是胃癌“痰环境”致病说,并认为胃癌的缺氧微环境可归于“痰环境”范畴,可导致“痰污染”,诱使胃癌侵袭转移.因此,从“痰”入手,以消痰散结为治疗大法,清化“痰污染”,从而逆转EMT,可终抑制胃癌侵袭转移.
-
脑红蛋白在胶质瘤中表达的研究进展
脑红蛋白(neuroglobin,NGB)是2000年Burmester发现的神经系统特异的携氧蛋白,广泛分布于人和动物组织器官中,主要在脊椎动物脑组织高度表达.目前研究认为,NGB在脑缺血缺氧状态下对神经元保护起着重要作用,缺氧能够诱导NGB的表达,而高表达的NGB则能够保护神经元免受缺氧损伤,从而在神经系统缺氧、缺血损伤中具有重要的神经保护功能,可为脑中风、新生儿窒息等缺血缺氧性神经系统病变及帕金森病、阿尔茨海默病等神经系统退行性疾病的治疗带来新的希望.NGB在肿瘤细胞缺氧微环境中的作用也开始受到关注,其在肿瘤细胞中的表达研究开始成为这一领域内的研究热点.本文就NGB的生物学结构、功能和它在神经胶质细胞瘤中分布及其在临床医学中的应用等研究进展作一综述.
-
YC-1对食管癌细胞Eca109缺氧诱导因子1α表达的抑制效应
食管癌是我国的常见消化道恶性肿瘤之一,在部分地区发病率和死亡率均在第一位,发现一种新的有效药物对于治疗食管癌具有重要意义.食管癌存在缺氧微环境,目前研究表明缺氧诱导因子(HIF)-1α在食管癌的发生中起着重要作用,与微血管密度、肿瘤远处转移、化学治疗药物敏感性等有关.
-
HIF-1α及多药耐药相关基因在结肠癌中的表达及意义
背景与目的:肿瘤微环境缺氧在实体肿瘤中是普遍存在的一种现象,本研究拟体外观测缺氧条件下结肠癌细胞系中缺氧诱导因子-1α和多药耐药相关基因的表达变化及其相互作用,探讨微环境缺氧对结肠癌化疗耐药的影响及其可能机制.方法:人结肠癌细胞株SW620置入缺氧环境持续培养12,24和48 h,以常氧培养组为对照.逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及Western blot检测HIF-1α及耐药相关基因mdr1/P-Gp、LRP mRNA及蛋白表达.结果:随着缺氧时间延长,HIF-1α及LRP mRNA的转录未见明显变化,而mdr1的mRNA转录呈时间依赖性增高(P＜0.05),其光密度比值从常氧下的0.0522±0.012上升至缺氧48 h下的0.145±0.017.随着缺氧时间延长,LRP的蛋白表达未见明显变化,而HIF-1α及P-Gp的表达则呈时间依赖性增高(P＜0.05),其光密度比值分别从常氧下的0.16±0.05,0.260±0.006上升至缺氧48 h下的0.49±0.04,0.86±0.20.HIF-1α及P-Gp的蛋白表达呈正相关.结论:研究证明结肠癌微环境缺氧是诱导其产生多药耐药性的重要原因之一.缺氧可通过HIF-1α调控结肠癌细胞内多药耐药相关mdr1/P-Gp基因的表达,从而使结肠癌存在以基因水平改变为基础的获得性耐药.
-
缺氧微环境对TSST-1诱导的抗CEA+结肠癌LoVo细胞免疫治疗的调控
目的:研究缺氧微环境对靶向性表达的超抗原中毒性休克综合征毒素-1(toxic shock syndrome toxin-1,TSST-1)激活人外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBL)对CEA+结肠癌LoVo细胞杀伤作用的调控.方法:包装、收集前期构建的缺氧反应元件( hypoxia-response elements,HRE)和癌胚抗原启动子CEAp联合调控的逆转录病毒载体pLEGFP-N1-5HRE-CEAp-TSST-1-linker-CD80TM(简称pLEGFP-N1-5HCTC),感染CEA+ LoVo细胞及CEA -宫颈癌HeLa细胞,获取稳定表达跨膜型超抗原TSST-1-linker-CD80TM蛋白(TC融合蛋白)的肿瘤细胞.用缺氧模拟试剂CoCl2模拟缺氧微环境,RT-PCR和Western blotting分别检测缺氧调控下TSST-1的表达水平.将健康人PBL与pLEGFP-N1-5 HCTC感染后的肿瘤细胞共培养,3H-TdR掺入法检测缺氧调控下PBL的增殖能力,MTT法检测缺氧调控下PBL对肿瘤细胞的杀伤效应.结果:pLEGFP-N1-5HCTC病毒成功感染CEA+LoVo细胞(5HCTC/LoVo),RT-PCR和Westernblotting证实,缺氧可上调5HCTC/LoVo细胞中TSST-1mRNA和蛋白的表达,CEA - HeLa细胞在常氧和缺氧条件下均无TSST-1的表达.缺氧可上调5HCTC/LoVo细胞诱导的人PBL的增殖(7.3×103 vs 3.1×103cpm,P＜0.05),缺氧环境下PBL对5HCTC/LoVo细胞的杀伤率明显高于常氧环境(82.69％vs 53.50％,P＜0.01)；CEA - HeLa细胞不能刺激PBL增殖,PBL对其也无抑制作用.结论:缺氧微环境可显著上调靶向性表达的超抗原TSST-1诱导的对CEA+ LoVo细胞的杀伤作用.
-
缺氧相关血管生成因子对肺癌预后及靶向治疗的临床价值
肺癌在所有癌症中发病率和死亡率高，其发生发展过程与微环境及新血管生成密切相关。缺氧条件下核转录因子-缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α， HIF-1α)调控肺癌血管生成，肺组织血管生成相关因子至关重要。本文综述了HIF-1α、血管生成相关因子与肺癌预后及靶向治疗的新进展。
-
缺氧对人乳腺癌MCF-7细胞miRNA-21表达的影响及与细胞增殖和凋亡的关系
[目的]观察缺氧环境下人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的情况,初步探讨缺氧对miRNA-21表达的影响及其与细胞增殖、凋亡的关系.[方法]CoCl2人工模拟缺氧环境,四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测缺氧环境下细胞增殖状况,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)测定不同缺氧程度下HIF-1α和miRNA-21表达水平的变化.[结果]与常氧对照组相比较,CoCl2处理组的细胞明显受到抑制,但100、200μmol/LCoCl2处理组的细胞在一定时间内仍增殖,抑制率随缺氧时间和药物浓度增加而上升.流式细胞仪检测结果显示,CoCl2处理组细胞凋亡率高于对照组(P＜0.05).RT-PCR检测显示,200、400μmol/L的CoCl2处理组培养24h后细胞的HIF-1α和miRNA-21表达高于对照组(P＜0.05).[结论]人乳腺癌MCF-7细胞可在一定缺氧程度和时间内生长,缺氧诱导细胞凋亡率增加,缺氧能上调HIF-1α、miRNA-21的表达,使之进一步耐受缺氧,其机制可能是上调的miRNA-21通过多个信号通路调控靶基因进而影响癌细胞的增殖及凋亡.
-
缺氧微环境中HIF-1α基因沉默的人绒毛膜癌细胞系JE G-3侵袭和迁移能力观察
目的 观察缺氧微环境中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)沉默的人绒毛膜癌细胞系JEG-3的侵袭、迁移能力.方法 取对数生长期JEG-3细胞分为A、B、C、D组,其中A、B、C组置于体外缺氧微环境培养,D组不处理.当细胞融合到60%~70%时A、C组分别用HIF-1αsiRNA和无关序列转染,B、D组不做处理.采用Transwell细胞侵袭试验及划痕试验检测各组细胞侵袭能力和迁移能力.采用实时荧光定量PCR法和蛋白印迹法检测各组细胞HIF-1α、CXCR4的mRNA和蛋白表达.结果 A组细胞的侵袭和迁移能力明显低于其余3组(P均<0.05),B、C组细胞侵袭和迁移能力显著高于D组(P均<0.05).A组细胞中HIF-1α、CXCR4的mRNA和蛋白表达均低于其余3组(P均<0.05),B、C组细胞HIF-1α蛋白、CXCR4 mRNA和蛋白表达均高于D组(P均<0.05).结果 缺氧微环境中HIF-1α沉默的JEG-3细胞侵袭、迁移能力下降,其机制可能与HIF-1α下调细胞CXCR4表达有关.
-
缺氧诱导因子-1α调控肝癌细胞对奥沙利铂耐药的机制
目的 探讨微环境缺氧及缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1 α)和多药耐药相关(multidrug resistance,MDR)基因在肝癌细胞耐药中可能的作用机制.方法 运用浓度梯度诱导法建立肝癌奥沙利铂耐药细胞株,流式细胞术检测不同耐药亚系细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量及细胞凋亡的情况.RT-PCR及Western blot检测HIF-1α及耐药相关基因MDR1、MRP1、BCRP的mRNA及蛋白表达.结果 随着耐药浓度的增加,细胞内活性氧含量逐渐减少,细胞凋亡率明显减少,HIF-1α、MDR1、MRP1、BCRP mRNA含量增加,蛋白水平和mRNA水平相一致.结论 肝癌细胞的微环境缺氧是诱导肝癌细胞对奥沙利铂产生耐药的重要原因之一.缺氧可以通过HIF-1α调控肝癌细胞内多药耐药相关MDR1、MRP1、BCRP基因的表达,也可以通过抑制凋亡而出现获得性耐药,从而使肝癌细胞对奥沙利铂产生获得性耐药.
-
胶质瘤干细胞微环境及其治疗靶点的研究进展
恶性胶质瘤是常见和具破坏性的原发性脑肿瘤,患者的中位总生存率仅15～19月.已有研究证实,胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)是存在于恶性胶质瘤中的一类具有较强自我更新、无限增殖能力和多向分化潜能的与神经干细胞类似的细胞群,并可能在肿瘤抗常规治疗和复发中起到关键性作用.由细胞间质及其中的体液成分构成的GSCs生存微环境,参与调控GSCs的增殖、分化、凋亡、耐药等机制,对维持干细胞的特性及肿瘤的破坏性意义重大.近年来相关微环境研究进展较大,使得胶质瘤的生长、浸润、迁移机制得到了更完善的解释,这也为恶性胶质瘤的治疗提供了新思路.本文将着重从GSCs的血管微环境、缺氧微环境、免疫微环境及其治疗靶点等方面进行综述.
-
缺氧下调结肠癌细胞株CDX2表达的研究
目的 探讨缺氧诱导因子1a(HIF-1α)和基因系尾型同源盒基因2(CDX2)在人结肠癌细胞株SW480和LS174T不同缺氧时间的表达及其可能的作用机制.方法 (1)MTT方法检测在不同CoCl2 浓度(100,150,200 p.mol/L)下和不同时点(24,36,48 h)时对SW480和LS174T细胞活力以及增殖的影响,筛选适宜的CoCl2作用浓度.(2)在细胞化学缺氧培养相应时段,采用半定量RT-PCR技术检测HIF-1α,Snail和CDX2的mRNA的表达变化;同时采用Western blotting技术检测CDX2的蛋白表达.结果 结肠癌细胞株在不同浓度CoCl2环境下随缺氧时间的延长,细胞活力明显受到抑制.在低浓度CoCl2(100 μmol/L)干预下,随着缺氧时间的延长,HIF-1α和Snail mRNA表达逐渐上升,缺氧24 h时达到高峰,CDX2 mRNA及蛋白表达水平逐渐下降.结论 缺氧诱导HIF-1α过表达可通过下调CDX2而加速结直肠癌的进展.
-
低氧诱导因子-1与造血调控
造血干/祖细胞的增殖、分化是依赖多种体液因子进行调节的,目前已经发现的参与造血调控的因子包括造血生长因子、造血抑制因子以及转录调控因子[1].其中,转录调控因子在调控造血分化的过程中发挥着关键性的作用,其通过对造血干/祖细胞基因表达的顺式和反式调控,决定着细胞的分化方向以及增殖特性.低氧诱导因子-1 (HIF-1)是近年来发现的能够在特异性缺氧环境下发挥活性的转录因子,其主要功能调节亚单位为HIF-1α[2].研究表明,HIF-1可以在正常和异常的骨髓内局部低氧环境中对造血细胞发挥重要的转录调控作用.本文就相关内容作一综述.
-
健脾化瘀方对缺氧微环境下结肠癌SW480细胞生物学行为的影响
目的 研究健脾化瘀方对体外模拟缺氧微环境下结肠癌SW480细胞生物学行为的影响.方法 CoCl2化学模拟结肠癌SW480细胞缺氧微环境,实验分为空白组、CoCl2组、健脾化瘀方不同浓度(0.2、0.4、0.8mg/mL)处理组.采用MTT法检测不同浓度健脾化瘀方对缺氧条件下结肠癌SW480细胞株增殖能力、黏附能力的影响,Transwell小室法观察对SW480细胞侵袭能力的影响.结果 缺氧条件下SW480细胞增殖能力有所下降,48 h时,中、高浓度健脾化瘀方对缺氧条件下SW480细胞的增殖有明显抑制作用,与CoCl2组比较,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);不同浓度的健脾化瘀方作用于缺氧条件下SW480细胞后,细胞黏附能力明显下降,并呈浓度依赖性;CoCl2组较空白组侵袭细胞数明显增多,各浓度的健脾化瘀方均能抑制SW480细胞体外侵袭能力,各浓度组穿过小室的细胞数随健脾化瘀方浓度的增大而减少,侵袭抑制率增大,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 健脾化瘀方在体外可明显抑制缺氧微环境下SW480细胞增殖、黏附及侵袭能力,具有一定的浓度依赖性.
-
缺氧微环境对宫颈癌Hela细胞HIF-1α及VEGF-A表达的影响
目的:研究在缺氧微环境下人宫颈癌Hela细胞中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子A(VEGF-A)的表达.方法:采用CoCl2构建Hela细胞体外缺氧微环境模型,使用CCK8法来检测细胞的增殖;使用实时荧光定量PCR法分别来检测HIF-1α和VEGF-A mRNA表达的变化;免疫细胞化学技术检测HIF-1α和VEGF-A蛋白的表达.结果:CCK8检测结果发现,CoCl2诱导的缺氧微环境能降低Hela细胞的增殖活性,随着CoCl2浓度的增加其增殖活性逐渐降低,在150μmol/L时降到低,各浓度组间总体差异有统计学意义(F=10.118,P=0.001,P<0.05),在相同CoCl2浓度构建的缺氧微环境中,随着缺氧时间的延长,其细胞增殖活性逐渐降低,在12 h降至低,而后增殖活性增加,各时间组总体差异有统计学意义(F=9.727,P=0.002,P<0.005).实时荧光定量PCR结果发现同对照组比较,缺氧处理3 h,HIF-1α和VEGF-A的mRNA表达无明显差异(P=0.86,P=0.72,P>0.05);随着缺氧时间增加,HIF-1α的mRNA表达在12 h时达峰值,随后下降,各时间组比较差异有统计学意义(F=1.627,P<0.001).VEGF-A mRNA表达随着缺氧时间的增加逐渐增加,各时间组比较差异有统计学意义(F=7.407,P<0.001).HIF-1α和VEGF-A在mRNA表达水平上无相关性(r=0.647,P>0.05);免疫细胞化学检测发现,在150μmol/LCoCl2构建的缺氧微环境下,随着时间延长HIF-1α蛋白表达逐渐增加,在12 h达到峰值,而后下降(F=100.930,P<0.001);VEGF的蛋白表达随时间延长而逐渐增加(F=118.336,P<0.001).HIF-1α和VEGF-A在蛋白表达水平上呈正相关(r=0.892,P<0.05).结论:CoCl2诱导的缺氧微环境能使Hela细胞中HIF-1α的表达,促进其下游靶基因VEGF-A在mRNA及蛋白水平表达升高.
