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胶体金免疫层析法用于产肠毒素葡萄球菌快速检测的研究
免疫层析技术是近10年来在免疫渗滤技术[1,2]的基础上建立的一种快速的免疫学检测技术,国内周继文等[3]、曾章新等[4]用免疫层析技术快速检测乙肝表面抗原获得较好的效果.本研究用胶体金标记产肠毒素金黄色葡萄球菌多价抗体,先制成胶体金探针,进而制成检测产肠毒素金黄色葡萄球菌免疫层析法(GICA)检测试纸条,用该法检测产肠毒素葡萄球菌,具有简便、快速、特异性好、需仪器及细菌抗原无需进行特殊处理等优点.
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HBsAb标记胶体金探针对HBV阳性血清感染HPT-8细胞的示踪研究
目的:为临床诊断提供HBv进入HPT-8的依据.方法:HBV阳性血清(1.5×108拷贝/毫升)体外感染HPT-8细胞48h,设感染组、阴性对照组和空白对照组,ELISA检测细胞培养上清中HBsAg、HBeAg,提取感染后传代的各代细胞中DNA用于PCR检测HBv DNA.免疫荧光定量PCR检测细胞培养上清中HBV DNA的滴度.采用乙肝表面抗原单克隆抗体标记的胶体金探针对感染的HPT-8细胞中的乙肝表面抗原进行标记示踪.结果:ELISA检测感染组细胞第1、2代培养上清中HBsAg阳性,PCR检测感染组第1、2代细胞HBV DNA,结果均阳性.免疫荧光定量PCR检测感染组细胞上清在第1、2代、3代48h的HBV滴度分别为8×104、4.6×103、<103(拷贝/毫升).通过胶体金探针的标记:乙肝表面抗原存在于感染细胞的溶酶体内、细胞膜和绒毛上.结论:血清中的HBV病毒能进入胎盘滋养细胞,并可从感染滋养细胞的树脂切片中获得乙肝表面抗原的超微结构定位.