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miR-223-3p靶向上皮细胞转化序列2基因调控胃癌细胞周期和凋亡的相关性研究
目的 探讨miRNA-223-3p和上皮细胞转化序列2基因(epithelial cell transforming sequence 2 oncogene,ECT2)在胃癌(gastric cancer,GC)细胞周期和凋亡中的作用和机制,并探讨其与GC临床病理因素的相关性及临床意义.方法 首先采用实时荧光聚合酶链反应法(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白质印迹法检测正常胃黏膜(GSE-1)和GC细胞(SGC-7901,BGC-823)中ECT2和miR-223-3p的表达水平;其次,采用免疫组织化学RT-PCR法检测80例GC患者的癌组织及相应的癌旁组织(距癌组织边缘＞5 cm)中ECT2和miR-223-3p的表达情况;miR-223-3p抑制物和模拟物转染SGC-7901细胞,RT-PCR和Western blot检测转染后miR-223-3p和ECT2的表达.后用流式细胞仪检测转染后细胞周期和凋亡的变化.结果 与正常胃黏膜细胞相比,GC细胞中ECT2和miR-223-3p的表达水平均明显升高(P＜0.05);免疫组织化学和RT-PCR结果显示,GC组织中ECT2阳性表达率显著高于癌旁组织(P＜0.05);两者表达均与GC的分化程度、Lauren分型相关(P＜0.05),与TNM分期密切相关(P＜0.01),与患者的性别、年龄、肿瘤直径、Bormann分型无明显相关(P＞0.05);两者之间表达呈显著正相关(P＜0.05);将miR-223-3p类似物转染SGC-7901细胞后ECT2表达上调,转染抑制剂后ECT2表达下调.miR-223-3p抑制物促使肿瘤细胞的G1期阻滞和促进凋亡作用.结论 miR-223-3p是一种与GC细胞周期和凋亡密切相关的miRNA分子,他可以通过影响ECT2的表达来调节GC细胞的细胞周期和凋亡;两者可以作为反映GC生物学行为的有效指标.
关键词： 胃癌 上皮细胞转化序列2基因 miR-223-3p 细胞周期 凋亡 -
微小RNA-223-3p通过调节MYH10基因促进巨核细胞多倍体化
目的 探讨微小RNA-223-3p(miR-223-3p)对巨核细胞分化和成熟的影响,并初步探索其中可能的机制.方法 通过实时定量PCR检测巨核细胞分化过程中miR-223-3p的内源性表达变化趋势,而后外源调节miR-223-3p在细胞系中的表达量,并通过流式细胞术检测其对于巨核细胞分化和成熟的影响,运用生物信息学分析,找到其发挥相关生物学作用的靶基因MYH10,并通过实时定量PCR、荧光素酶、流式细胞术验证MYH10是miR-223-3p的靶基因.结果 内源性miR-223-3p随着巨核细胞的分化成熟表达量增加,在K562和Meg-01细胞系中转染miR-223-3p mimics后可升高巨核细胞相关表面标志CD41和CD61的阳性率,同时显著促进多倍体的形成,MYH10的基因表达随miR-223-3p表达升高而下降,通过双荧光素酶报告基因技术验证MYH10基因是miR-223-3p的靶基因,进一步抑制MYH10基因表达后,可促进巨核细胞多倍体化.结论 miR-223-3p可通过调控MYH10的表达调节巨核细胞的成熟.
关键词： miR-223-3p MYH10 巨核细胞 聚合酶链反应 流式细胞术 -
miR-223-3p在不同分期的糖尿病肾脏疾病血浆中的表达差异及意义
目的 探索miR-223-3p在糖尿病肾脏疾病(DKD)患者血浆中的表达情况及其临床意义.方法 应用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)分别检测糖尿病无肾病组60例(DM组)、糖尿病早期肾病组60例(Micro-DKD组),糖尿病临床期肾病组60例(Macro-DKD)和正常健康对照组60例(Control组)血浆中miR-223-3p的表达变化,分析其与糖尿病肾脏疾病的关系;运用基因预测分析软件预测miR-223-3p靶基因.结果 与Control组相比,其余3组患者血浆中miR-223-3p的表达水平明显下降(P＜0.001),随着病情严重程度的进展,血浆中miR-223-3p的表达水平下降更加明显.生物信息学分析得出IL6ST和PRKCE为miR-223-3p的靶基因.结论 miR-223-3p表达水平在DKD患者血浆中表达下降并与严重程度有关,可能通过调控其下游靶基因在糖尿病肾脏疾病发生过程中起重要作用.
关键词： miR-223-3p 糖尿病肾脏疾病 实时荧光定量PCR 靶基因
