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3种富集胃癌患者外周血中胃癌细胞方法的比较
目的:建立一种富集胃癌患者外周血中癌细胞的有效方法.方法:先将不同浓度胃癌MGC-803细胞加入到健康人外周血中,再用淋巴细胞分离液收集单核细胞,然后等分成3份,并用3种方法处理-A方法,用CD45磁珠去除白细胞;B方法,用Ber-EP4磁珠富集癌细胞;C方法,先后使用上述2磁珠.后用定量RT-PCR检测看家基因β2微球蛋白(β2MG)mRNA的量.同法检测30例胃癌患者外周血.结果:β2MG mRNA扩增曲线的交叉点(crossing point,Cp)数值与癌细胞数间有良好的负相关(方法A,P＜0.05,方法B或C,P＜0.01).方法C检测到的Cp值为3种方法中大的;其灵敏度为1 mL血中含有1个癌细胞.用A、B和C方法检测30例胃癌患者外周血癌细胞的阳性率分别为70.00%,60.00%和36.57%(C与A比较,X2=5.79,P＜0.05;C与B比较,x2=4.92,P＜0.05).结论:在检测胃癌患者外周血癌细胞的实验中,联用阴性和阳性免疫磁珠可减少来自外周血白细胞的污染.
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血清差异表达多肽谱用于人卵巢癌诊断的研究
目的:建立卵巢癌患者血清差异表达多肽谱,并探讨其潜在诊断价值.方法:应用磁珠富集多肽结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)检测方法,筛选上皮性卵巢癌组和健康对照组差异表达多肽峰,利用ClinProTools软件比较两组血清多肽表达差异并建立差异表达多肽谱及早期诊断模型.结果:在卵巢癌组血清中,m/z 2 662.02、2 653.68、5 859.21、5 901.69、5 937.06表达显著上调;m/z 1 857.82、2 074.28、2 856.33表达显著下调.差异表达图谱建立的诊断模型预测早期卵巢癌的准确率达到81.8％(9/11),利用9例宫颈癌血清验证均为阴性,特异性达100％(0/9).结论:磁珠富集-质谱结合Clin ProTools生物信息学分析技术,有望成为新的人卵巢癌辅助诊断技术.
