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脂多糖对AR42J细胞Toll样受体7、9表达的影响
目的 探讨Toll样受体(TLR)7、9在急性胰腺炎(AP)发病机制中的作用.方法 用含1、10、100 mg/L脂多糖的培养基处理正常大鼠胰腺腺泡细胞株AR42J,构建AP体外细胞模型,以不加脂多糖处理的细胞作为对照组.培养24h后收集细胞及培养上清液.采用RT-PCR法和蛋白质印迹法分别检测细胞TLR7、TLR9 mRNA及蛋白的表达,ELISA法检测培养上清液中TNF-α、IL-10含量.结果 对照组及1、10、100 mg/L脂多糖处理组细胞TLR7 mRNA表达量分别为0.12 ±0.09、0.28 ±0.06、0.49±0.04、0.78 ±0.04;TLR9 mRNA表达量为0.06±0.02、0.32 ±0.03、0.56±0.14、0.84 ±0.12;TLR7蛋白表达量为0.04±0.01、0.26±0.05、0.49 ±0.04、0.77 ±0.16; TLR9蛋白表达量为0.10±0.14、0.62±0.23、1.21 ±0.26、1.75±0.13.培养上清液中TNF-α含量分别为(8.01±5.32)、(25.64±8.71)、(49.06±10.23)、(75.83±6.65) ng/L; IL-10含量分别为(155.54±25.47)、(105.16±10.49)、(69.36±8.19)、(14.07±9.06) ng/L.细胞TLR7和TLR9的mRNA及蛋白表达量、培养上清液中TNF-α含量均随脂多糖浓度升高而逐渐升高,而培养上清液中IL-10含量随脂多糖浓度增加逐渐下降,各组间的差异均具有统计学意义(P值均<0.01).结论 脂多糖处理AR42J细胞后细胞的TLR7、TLR9基因表达明显上调,提示两者在AP疾病发展中可能发挥重要作用.