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蜱虫叮咬所致红肉过敏
蜱虫叮咬致病报道增多,已引起医务工作者重视。目前,大多数医务工作者关注蜱虫叮咬所引起的感染性疾病,而对蜱虫叮咬所致红肉过敏关注甚少,本文从蜱虫叮咬与红肉过敏的相关性,以及蜱虫叮咬所致红肉过敏的发病机制、诊断与鉴别诊断、治疗及预后等方面综述蜱虫叮咬所致红肉过敏的研究进展,以期为临床提供参考。
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靶向性抗肿瘤VEGF-α-Gal融合蛋白的原核表达、纯化及其体外活性
目的 原核表达、纯化靶向性抗肿瘤VEGF-α-Gal融合蛋白,并检测其体外靶向性和抗肿瘤效应.方法 从人肺腺癌A549细胞中扩增VEGF-α-Gal融合基因,插入pQE30载体,构建重组表达质粒pQE30-VEGF-α-Gal,转化至大肠杆菌M15中,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析重组融合蛋白的表达量及表达形式,Western blot分析重组蛋白的反应原性.经Ni-Agarose His标签蛋白纯化试剂盒纯化重组融合蛋白rVEGF-α-Gal,包涵体复性后,通过体外细胞黏附试验评价其VEGFR靶向性,血清杀伤试验分析其α-Gal模拟表位的体外抗肿瘤活性.结果 重组表达质粒pQE30-VEGF-α-Gal经双酶切及测序证实构建正确;表达的重组融合蛋白相对分子质量约为18000,诱导5h表达量高,约占菌体总蛋白的15%,主要以包涵体形式表达;重组融合蛋白可分别与抗VEGF、抗α-Gal抗体特异性结合;纯化的重组蛋白纯度约为90%,可黏附VEGFR+的A549细胞,且其α-Gal模拟表位在人新鲜血清的参与下,对A549细胞产生了明显的溶细胞效应.结论 成功表达并纯化了重组融合蛋白rVEGF-α-Gal,该蛋白不但具有VEGFR靶向性,还兼具α-Gal表位功能,为研发新型靶向肿瘤生物制剂奠定了基础.