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兔滑膜成纤维细胞文献资料
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白细胞介素-1β小干扰RNA的设计、合成及筛选
目的 设计和合成针对白细胞介素-1β(IL-1β)的特异性小干扰RNA(siRNA),研究其对体外培养的薪西兰白兔膝关节滑膜成纤维细胞表达IL-1β mRNA的干扰作用,筛选出有干扰效果的IL-1β siRNA,为进一步构建IL-β特异性双链RNA(dsRNA)质粒载体创造条件.方法 参照siRNA的设计原则,采用Ambion公司提供的软件,利用Finder程序查找和设计针对IL-1βsiRNA的正义和反义寡核苷酸链.体外转录法合成4个IL-1β siRNA,将合成的IL-1β siRNA分别转染体外培养的新西兰白兔膝关节滑膜成纤维细胞,并以未转染细胞作为空白对照,采用RT-PCR技术检测所合成的IL-1β siRNA对体外培养的兔滑膜成纤维细胞IL-1βmRNA表达的影响.结果转染48小时后,4条IL-1βsiRNA链中有1条(L4)能够使兔滑膜成纤维细胞IL-1β mRNA的表达水平明显下调,其余3条IL-1β siRNAs链未见明显的干扰效果.结论 不同的IL-1βsiRNA对兔膝关节滑膜成纤维细胞IL-1βmRNA表达水平具有不同的干扰效能.成功筛选出1个有效的IL-1β siRNA,初步提示RNA干扰技术可用于抑制兔膝关节滑膜成纤维细胞IL-1β mRNA的表达.
