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他克英司结合蛋白质类文献资料
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胰岛素样生长因子-1促血管平滑肌细胞增殖的信号转导机制
目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)促血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的细胞内信号转导机制及雷帕霉素干预作用. 方法兔血管平滑肌细胞分6组处理,以细胞计数、噻唑盐比色法测定细胞增殖能力,Western Blot测定蛋白激酶B (PKB)表达水平,免疫沉淀、特异底物组蛋白H2Bγ32 P掺入量测定PKB活性.以磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂渥漫青霉素处理细胞间接反映PI3K作用. 结果 IGF-1使细胞增殖增加至2.8～3.8倍,IGF-1对PKB活性的影响呈浓度(1～100 μg/L)依赖性增加及时间(10 min～24 h)依赖性降低, 1 μg/L刺激10 min即使PKB活性增至2倍,100 μg/L时增至近60倍,100 μg/L刺激24 h PKB活性增加仍达4倍以上.雷帕霉素在浓度为10～100 nmol/L范围内使PKB活性进行性降低25%～73%,渥漫青霉素和雷帕霉素使VSMC增殖至少降低30%,并完全逆转IGF-1的上述作用. 结论雷帕霉素可抑制IGF-1促VSMC增殖及对生长信号PI3K/PKB的活化.
