首页 > 文献资料
-
血管紧张素Ⅱ对不同年龄大鼠异丙基肾上腺素激动β受体效应的影响
目的研究3.5月龄与12.0月龄SD大鼠心脏血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对β肾上腺素受体(β-AR)激动剂异丙基肾上腺素(Iso)诱导的环磷酸腺苷(cAMP)蓄积水平的影响和激动血管紧张素Ⅱ受体(ATR)对β-AR激动后介导的正性变力效应的影响. 方法采用放射免疫法测定心脏cAMP、环磷酸鸟苷(cGMP)水平,采用离体左心房收缩功能实验测定心脏正性变力效应. 结果 Iso刺激后3.5月龄大鼠心脏cAMP水平明显升高[(1 027±169)pmol*mg心肌组织-1与(1 400±267)pmol*mg心肌组织-1,P＜0.05];AngⅡ加Iso联合刺激后3.5月龄与12.0月龄大鼠心脏cAMP水平均明显升高[(1 027±169)pmol*mg心肌组织-1与(1 865±329)pmol* mg心肌组织-1, P＜0.01;(1 047±266)pmol*mg心肌组织-1与(1 697±430)pmol*mg心肌组织-1, P＜0.01)];Iso刺激后3.5月龄大鼠心脏cGMP水平明显下降;在3.5月龄大鼠离体左心房用10个不同浓度的AngⅡ刺激未能诱导出正性变力效应;AngⅡ使3.5月龄大鼠心脏Iso的累积浓度-收缩效应曲线左移,大收缩效应增强,但在12.0月龄大鼠则没有出现这种变化. 结论 AngⅡ对Iso诱导的心脏cAMP蓄积有明显的正协同作用; AngⅡ可增强3.5月龄大鼠心脏β-AR激动后介导的正性变力效应,而随年龄增长这种增强作用消失.
-
重组信号分子GRF的PH结构域抑制蛋白激酶C活性
目的 鉴定表达guanine-nucleotide-releasing factor (GRF)的pleckstrin homology （PH）结构域与谷胱甘肽转移酶（GST）融合蛋白的可溶性，并进一步检测该重组蛋白与蛋白激酶C（PKC）的结合及对PKC活性的影响. 方法 将表达GRF的PH结构域与GST融合蛋白的菌体经超声裂解，上清中的融合蛋白用琼脂糖珠锚定纯化. Western blot检测融合蛋白与PKC的结合，以PKC活性检测试剂盒测定结合后PKC的活性变化. 结果 获得信号分子GRF的PH结构域-GST融合蛋白的可溶性表达. Western blot结果表明,GRF的PH结构域可在体外与PKC结合.PKC活性实验显示,GRF的PH结构域抑制PKC活性. 结论 GRF的PH结构域可在体外与PKC结合并对PKC的活性具有下调作用.
