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非接触式共培养下两种同源间充质干细胞对退变髓核细胞生物学影响的比较研究
目的：比较非接触式共培养条件下两种同源间充质干细胞对退变髓核细胞生物学功能的影响。方法：取同一腰椎间盘突出症患者骨髓间充质干细胞（BMSCs）、脂肪间充质干细胞（ADSCs）和退变髓核细胞（NPCs），两种间充质干细胞分别与髓核细胞在Tanswell 6孔板中进行非接触式共培养，与ADSCs共培养的NPCs为A组，与BMSCs共培养的NPCs为B组，以单独培养的NPCs为对照组。共培养7d后，提取3组髓核细胞总RNA，进行反转录后，利用Real-Time PCR检测其Ⅱ型胶原、蛋白多糖和SOX-9基因的相对表达量。结果：非接触式共培养7d后，Ⅱ型胶原、蛋白多糖和SOX-9基因相对表达量对照组分别是1.03±0.28、1.21±0.40和0.94±0.34，A组分别是3.49±0.55、3.88±2.11和2.41±0.91，B组分别是7.60±1.89、6.26±2.96和4.55±1.88。与对照组相比，A、B组髓核细胞Ⅱ型胶原、蛋白多糖和SOX-9基因相对表达显著增加（P<0.05）；A、B两组间相比也有显著性差异（P<0.05）。结论：非接触式共培养条件下骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞对退变髓核细胞均有一定的激活效应；骨髓间充质干细胞对退变髓核细胞的激活效应更强，可能更加适合于椎间盘退行性疾病的生物学治疗。
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非接触共培养条件下骨髓间充质干细胞向类髓核细胞的诱导分化
背景：组织工程中间充质干细胞治疗椎间盘退变性疾病为退变椎间盘结构和功能恢复提出了一种新型的治疗方案，是目前研究的热点。
目的：分析兔骨髓间充质干细胞向类髓核细胞分化的潜能。
方法：将第3代兔骨髓间充质干细胞与兔髓核细胞按培养要求分为3组：普通6孔板单纯培养骨髓间充质干细胞组，普通6孔板单纯培养髓核细胞组，骨髓间充质干细胞与髓核细胞共培养组，Transwell 6孔板底部接种第3代骨髓间充质干细胞，上层接种第3代髓核细胞。倒置显微镜观察各组细胞形态的变化，在培养第7天采用免疫细胞化学、RT-PCR及Western blot技术测定各组细胞Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达。
结果与结论：①共同培养第7天，骨髓间充质干细胞呈多角形、短梭形改变，无纤维样变化，形态接近髓核细胞；②共培养组骨髓间充质干细胞Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达与单独培养髓核细胞组相近，显著高于单独培养骨髓间充质干细胞组；③结果表明，非接触共培养条件下，髓核细胞具有诱导骨髓间充质干细胞向类髓核细胞分化的潜能，为椎间盘退变性疾病的生物学治疗提供大量的细胞来源。 -
人脐带华通胶间充质干细胞对白细胞介素1β诱导髓核细胞退变的保护作用
背景:人脐带华通胶间充质干细胞移植到犬退变椎间盘模型中可存活,恢复部分椎间盘高度,但其对炎性损伤后髓核细胞是否有修复治疗作用目前还没有文献报道.目的:观察人脐带华通胶间充质干细胞对白细胞介素1β诱导大鼠髓核细胞退变的保护作用.方法:将第3代SD大鼠髓核细胞分3组培养,对照组用含胎牛血清的培养基培养24 h,然后换完全培养基培养24 h;白细胞介素1β组以含白细胞介素1β和胎牛血清的培养基培养24 h,然后换完全培养基培养24 h;实验组先以含白细胞介素1β和胎牛血清的培养基培养24 h,再更换完全培养基与人脐带华通胶间充质干细胞非直接共培养24 h.采用Annexin V/PI染色后流式细胞仪测定3组髓核细胞凋亡率,RT-PCR测定各组髓核细胞基质金属蛋白酶4、基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶抑制剂1的表达,caspase试剂盒检测caspase-3、caspase-8和caspase-9活性.结果与结论:①白细胞介素1β组、实验组细胞凋亡率高于对照组(P<0.05),实验组低于白细胞介素1β组(P<0.05);②白细胞介素1β组、实验组基质金属蛋白酶4、基质金属蛋白酶3表达量高于对照组(P<0.05),基质金属蛋白酶抑制剂1表达量低于对照组(P<0.05);实验组基质金属蛋白酶4、基质金属蛋白酶3表达量低于白细胞介素1β组,基质金属蛋白酶抑制剂1表达量高于白细胞介素1β组(P<0.05);③白细胞介素1β组、实验组caspase-3、caspase-8、caspase-9相对活性高于对照组(P<0.05),实验组caspase-3、caspase-8、caspase-9相对活性低于白细胞介素1β组(P<0.05);④结果表明,人脐带华通胶间充质干细胞对白细胞介素1β诱导的髓核细胞退变凋亡有明显的抑制作用.
