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微小RNA-100靶向成纤维生长因子受体调控胰腺癌细胞的增殖
目的 探讨微小RNA(miR)-100对成纤维生长因子受体3(FGFR3)调控及其对胰腺癌细胞增殖的影响.方法 采用实时PCR检测17对胰腺癌和癌旁组织中miR-100的表达水平.应用CCK-8试剂盒检测过表达miR-100对胰腺癌细胞株增殖的影响.利用分子生物学技术构建FGFR3的野生型及突变型3’-UTR报告基因,分析miR-100对FGFR3的调控作用,然后采用实时PCR和蛋白印迹检测过表达miR-100对FGFR3 mRNA和蛋白表达水平的影响.应用CCK-8、5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Edu)探讨特异性敲低FGFR3对胰腺癌细胞株增殖的影响.结果 miR-100在胰腺癌组织中呈低表达水平(P＜0.05).过表达miR-100可显著抑制胰腺癌细胞的增殖(P＜0.05).报告基因分析显示miR-100能够显著下调FGFR3的野生型3’-UTR报告基因的荧光表达(P＜0.05),而对突变型报告基因和空白对照组的荧光表达影响不大.实时PCR和蛋白印迹检测显示miR-100可显著抑制FGFR3的mRNA和蛋白表达(P＜0.05).特异性敲低FGFR3后明显抑制胰腺癌细胞的增殖(P＜0.05).结论 miR-100可通过调控FGFR3表达来抑制胰腺癌细胞的增殖,从而在胰腺癌中发挥抑癌基因的功能.
关键词： 胰腺癌 微小RNA-100 成纤维生长因子受体3 细胞增殖 -
微小RNA-100表达与结直肠癌患者临床病理特征和预后的相关性
目的：探讨微小RNA?100（ miR?100）在结直肠癌组织中的表达情况及其与临床病理特征及预后的关系。方法采用实时定量PCR方法检测172例结直肠癌组织及癌旁组织中miR?100的表达水平，并分析其与临床病理特征及预后的关系。构建miR?100高表达结直肠癌HCT?8?miR?100细胞及对照HCT?8?NC细胞，采用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖，采用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况，采用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。结果结直肠癌组织和癌旁组织中miR?100的相对表达水平分别为－6．185±1．921和－3．698±1．786，差异有统计学意义（P＜0．01）。有淋巴结转移和无淋巴结转移的结直肠癌组织中miR?100的相对表达水平分别为－5．706±1．809和－6．775±1．902，差异有统计学意义（ P＜0．01）。Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期结直肠癌组织中miR?100的相对表达水平分别为－7．267±1．888、－6．443±1．859、－5．923±1．796和－4．639±1．516，差异有统计学意义（P＜0．01）。高、中、低分化结直肠癌组织中miR?100的相对表达水平分别为－7．389±1．828、－6．095±1．843和－5．476±2．088，差异有统计学差异（ P＜0．01）。生存分析显示，miR?100高表达组和低表达组患者术后随访41个月的生存率分别为78．0％和86．0％，差异无统计学意义（P＝0．179）。细胞实验显示，miR?100高表达可抑制结直肠癌HCT?8细胞增殖，促进细胞凋亡和细胞迁移。结论 miR?100表达与结直肠癌淋巴结转移、肿瘤分化程度和TNM 分期有关。 miR?100有可能作为提示结直肠癌淋巴结转移及恶性进展的潜在标志物。
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微小RNA-100在胃癌中的表达及临床意义
目的:探讨微小RNA-100(microRNA-100,miRNA-100)在胃癌患者组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系.方法:提取50例胃癌及其癌旁非肿瘤组织标本的总RNA,采用TaqMan探针实时荧光定量PCR方法检测miRNA-100的表达量;并分析其与肿瘤分化程度、淋巴结转移等临床病理学特征的关系.结果:胃癌及配对癌旁非肿瘤组织中miRNA-100的相对表达量分别为1.31 ±0.69和0.74 ±0.36,差异有统计学意义(P＜0.01).胃癌组织中miRNA-100的表达在年龄、性别、肿块大小、肿块位置、分化程度、淋巴结转移以及TNM分期中差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:miRNA-100在胃癌中的异常表达可能与胃癌的发生有关.
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微小RNA-100在胃癌患者血浆中的表达及临床意义
目的 观察微小RNA-100(miR-100)在胃癌患者血浆中的表达情况,探讨其与临床病理特征之间的关系及临床意义.方法 采用实时定量聚合酶链反应检测30例胃癌患者及30例正常成年人血浆中miR-100的表达情况,分析其与临床病理参数之间的相关性.结果 胃癌患者血浆中的miR-100表达水平显著高于正常成年人(P＜0.05)；血浆miR-100表达水平与肿瘤分化程度有关(P＜0.05),而与淋巴结转移、分期、性别、年龄无明显相关(P＞0.05).结论 血浆miR-100作为新的生物学指标对于胃癌的诊断具有一定的价值.
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微小RNA-100下调S100A4表达抑制膀胱癌细胞迁移
目的 观察在膀胱癌细胞中微小RNA(miRNA,miR)-100对靶基因S100A4的调控及细胞迁移的影响.方法 基于Sanger数据库对miR-100进行靶基因预测,利用慢病毒Lenti-miR-100、Lenti-shS100A4感染膀胱癌细胞EJ、T24,应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、Western blot检测S100A4mRNA和蛋白的表达,并通过Transwell迁移实验检测高表达miR-100及敲低S100A4对膀胱癌细胞EJ、T24迁移能力的影响.结果 RT-qPCR和Western blot表明,与对照细胞比较,高表达miR-100膀胱癌细胞EJ、T24中S100A4表达水平明显受到抑制(P＜0.01),细胞的迁移数为(130.0±3.2)个,明显低于对照组[(450.0±1.5)个,P＜0.01];S100A4基因沉默可明显抑制膀胱癌细胞EJ、T24迁移能力,为(137.0±5.3)个(P＜0.01).结论 miRNA-100可通过下调S100A4表达抑制膀胱癌细胞迁移.
