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  • 人感染 H7 N9禽流感病毒血凝素蛋白线性 B 淋巴细胞抗原表位的预测及鉴定

    作者:陶薇;高孟;姜立民;谢珲;倪红霞;高丽美;罗永能;洪艳;何卓晶;傅婷

    目的:预测并鉴定人感染H7N9禽流感病毒血凝素(HA)蛋白的线性B淋巴细胞抗原表位及H7亚型的特异性。方法选取绍兴市人民医院提供的人感染H7 N9患者不同时间的三份血清样本和一份健康对照血清样本,采用TMHMM Sever v.2.0预测蛋白质胞外区,采用DNAStar Lasergene’ s Protean、BcePred和ABCpred预测其优势B淋巴细胞抗原表位,并用间接酶联免疫吸附试验( ELISA)验证预测的B淋巴细胞抗原表位的免疫原性。使用Clustal X2.1软件将预测抗原表位与GenBank上H7N9和H1~H16亚型流感病毒HA蛋白的氨基酸序列进行多重序列比对以分析预测抗原表位的H7亚型特异性,采用Cn3D 4.3.1软件分析预测的线性B淋巴细胞抗原表位在H7N9禽流感病毒HA蛋白中的分布情况。结果 HA蛋白可能的B淋巴细胞表位位于胞外区N端的第172~183、363~380、452~472和第491~506四个区段。 ELISA结果表明,四个预测的B淋巴细胞表位均与已确诊患者血清发生阳性反应。多重序列比对结果发现第172~183和452~472区段与其他亚型氨基酸序列差异大,可能具有更好的H7亚型特异性。 HA蛋白的三维结构进一步证明预测的四个B淋巴细胞抗原表位均位于HA蛋白表面。结论鉴定出了四个 HA蛋白线性B淋巴细胞抗原表位,其中第172~183和452~472区段具有更好的H7亚型特异性,可作为新型疫苗表位设计和H7抗原和抗体的特异性检测的依据。

  • CD19+CD5+B细胞和白细胞介素-10在系统性红斑狼疮患者外周血中的变化及意义

    作者:杨金华;介绍亮;吴萌;闫成兰;张少然;罗静;张慧玲;李小峰;陈俊伟

    目的:探讨CD19+CD5+B细胞及细胞因子IL-10在SLE患者外周血中的变化及意义。方法选取46例SLE患者及10名健康对照,分别用流式细胞术及ELISA法检测外周血中CD19+CD5+B细胞的数量及血清IL-10的水平,并比较其与SLEDAI评分、ESR、补体之间的相关性。采用单因素方差分析,两两比较用LSD-t检验,以Spearman相关进行相关性分析。结果 SLE患者外周血中CD19+CD5+B细胞百分率[(5.7±2.1)%]明显低于健康对照组[(19.1±2.9)%](t=2.431,P=0.005),与SLEDAI评分呈负相关(r=-0.292,P=0.049);SLE患者血清中IL-10的水平[(18.8±13.5) pg/ml]明显高于健康对照组[(8.3±2.9) pg/ml](t=3.021,P=0.003),且与SLEDAI评分呈正相关(r=0.322,P=0.029)。结论外周血中CD19+CD5+B细胞和IL-10是参与SLE发生发展的重要因素,并与疾病活动度相关。

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