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冠状病毒的特性及其致病性研究进展
冠状病毒在自然界中广泛存在,其自然宿主包括家畜、禽类、鼠类及野生哺乳类动物等,尤其是有飞翔能力的哺乳动物-蝙蝠,是多种冠状病毒的自然储存宿主,也是病毒扩散、传播及致动物或人类疾病流行的传染源.已发现有6种冠状病毒可使人类致病,其中SARS-CoV及MERS-CoV具有高致死率.由于冠状病毒有广泛宿主的特点以及自身基因组的结构特征,使其在进化过程中极易发生基因重组和变异,呈现遗传多样性.新亚型及新的冠状病毒在此过程中不断出现,使该病毒可发生跨种属感染,也对感染的预防与治疗带来较大的困难.本文对冠状病毒的形态结构、分类、基因组与受体的特点、致病性和防治感染的措施等研究文献,作了回顾与论述.
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棘突蛋白在冠状病毒跨宿主感染中的作用
冠状病毒感染有相对严格的宿主和组织特异性,其中部分病毒在演化中会发生细胞嗜性改变.冠状病毒的跨宿主感染能力主要取决于病毒表面棘突蛋白的变异及其与受体相互作用的特异性改变.棘突蛋白的变异主要集中在受体结合域(RBD),其他区域也与病毒感染的宿主细胞特异性有关.另外,较大的RNA基因组、独特的套氏亚基因组转录、复制过程中模板转换引起的高频率基因重组等使冠状病毒不断出现毒力或宿主变异,而共感染和持续性感染则为病毒重组及跨宿主感染提供了机会.
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HCMV体外感染小鼠胚胎成纤维细胞的研究
目的 观察人巨细胞病毒(HCMV)AD169株体外感染小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的生物学特征,为探讨HCMV AD169株能跨种属感染MEF提供依据.方法 将100 TCID50 HCMV AD169株病毒悬液接种至MEF和人胚胎成纤维细胞(HF)上,逐日观察HCMV特征性细胞病变效应(CPE);分别收集感染后1、3、5 d 的MEF和HF培养物,提取细胞DNA,采用实时荧光定量PCR检测HCMV立即早期基因(IE)拷贝数变化;分别采用HCMV立即早期基因(IE-1)、主要衣壳蛋白(MCP)和包膜糖蛋白(gB)单克隆抗体进行间接免疫荧光实验检测感染后的1、3、5 d MEF和HF中相应病毒蛋白的表达.结果 观察到HCMV AD169株接种MEF出现病毒所致CPE,与HF出现的CPE相似;实时荧光定量PCR检测HCMV IE基因拷贝数发现,MEF在HCMV AD169感染后的1、3、5 d,病毒基因拷贝数呈增长趋势,但均低于相同时间点的HF中病毒拷贝数;间接免疫荧光检测HCMV感染MEF和HF后1、3、5 d HCMV IE-1、MCP和gB蛋白表达情况时发现,在MEF上HCMV IE-1、MCP和gB蛋白表达随时间延长呈增强趋势.结论 HCMV AD169株可以体外感染MEF,并在其中复制增殖.