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HBV感染者HBsAg和HBsAb同时阳性的血清学异常模式的研究
目的：分析HBsAg和HBsAb同时阳性的慢性HBV感染者的血清学模式，分析病毒Pre-S/S区基因序列变异或缺失情况对其进行基因分型，并探讨其临床意义。方法采用酶联免疫分析法筛选出HBsAg和HBsAb同时阳性的慢性HBV感染者共100例，采用化学发光微粒子免疫分析确认，用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测其HBV DNA含量，其中HBV DNA阳性者60例， HBV DNA阴性者40例。将60例HBsAg和HBsAb同时阳性的慢性HBV感染者作为实验组，并选取60例HBsAg（+）HBsAb（-）的慢性乙型肝炎患者作为对照组。采用PCR法体外扩增两组患者HBV Pre-S/S基因序列并测序分析，根据测序结果对患者的基因型进行分型，比较两组Pre-S/S基因变异情况，结合临床资料探讨其临床意义。结果实验组患者中B基因型19例、C基因型41例，对照组患者中B基因型18例、C基因型42例。实验组B基因型患者的年龄[（50.0±16.3）岁]大于C基因型[（34.0±13.4）岁]，差异具有统计学意义（F=31.6，P=0.0432）。实验组B基因型和C基因型的S区氨基酸突变率分别为10.8%和21.6%，差异具有统计学意义（F=24.31，P=0.046）。同样为C基因型的两组患者，实验组S区氨基酸突变为41.6%，显著大于对照组的氨基酸突变率（3.2%），差异具有统计学意义（F=85.68，P=0.006）。结论 HBsAg（+）且HBsAb（+）并伴有HBeAg（+）的患者血清中HBV DNA的阳性率显著增高。HBsAg和HBsAb同时阳性的现象与pre-S/S区基因突变具有显著关性，且C基因型的突变率高于B基因型患者的突变率。
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慢性乙型肝炎感染者HBV Pre-S/S基因变异特征分析
目的 探讨慢性乙型肝炎感染者HBV Pre-S/S基因序列特征及不同抗原表位氨基酸的变异情况.方法 采用巢式PCR法分片段扩增HBV-DNA阳性的慢性乙型肝炎感染者HBV的Pre-S/S基因,并对扩增产物进行测序,将测序结果与Gen Bank中的标准序列比对分析.结果 120例HBV感染者中B基因型78例,C基因型42例.序列分析发现,B基因型中有2例出现Pre-S1基因序列缺失;C基因型中有1例出现Pre-S2基因序列缺失.Pre-S/S蛋白区抗原表位变异分析可知,除CTL的3个抗原表位(CTL-7、8、9)外,其它检测的抗原表位均出现变异.相关性分析发现,除B细胞4、5表位,CTL4、5表位及Th细胞1表位的变异与样品的基因型具有一定的相关性(P＜0.05),其它表位的变异与样品基因型无统计学意义.抗原表位具体氨基酸变异分析发现,Pre-S1/S2基因位点如27、45、46、48等氨基酸变异可导致多个抗原表位同时发生变异;在“a”决定簇中还发现126、129、131、133、144、145等热门位点的变异,B基因型中有2例发生G145R经典逃逸株的变异;C基因型中发现7例与严重肝病有一定相关性的I126T位点变异.结论 慢性乙型肝炎感染者HBV Pre-S/S基因上也普遍存在基因变异,其中包括G145R、I126T等热门突变位点,这些位点的氨基酸突变可导致Pre-S/S蛋白区一个或多个抗原表位的改变,进而影响其免疫原性,并导致HBV逃避宿主的免疫监视而引起持续感染.
