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解脲脲支原体多带抗原基因分型鉴定及其临床应用研究
目的应用PCR技术对解脲脲支原体(Uu)多带抗原进行分型鉴定,探讨Uu各种基因型与临床病原学之间的关系. 方法 根据解脲脲支原体多带抗原基因(MBA)与16S rRNA基因和尿素酶基因结构设计10对引物,采用PCR基因扩增技术,对 384例非淋菌性尿道炎和其他泌尿生殖道感染患者的临床标本,进行解脲脲支原体生物变种和基因型分型鉴定,并与Uu培养法作比较. 结果 384例性病门诊患者临床标本中,检测Uu培养阳性 218例,阳性率56.8%;PCR基因扩增检测Uu-DNA阳性 208例,总阳性率为54.2%:其中生物变种1(biovar 1) 143例,占37.2%, 生物变种2 (biovar 2) 65例,占16.9%;基因分型结果:生物变种1血清变种1 (serovar 1) 50例,占13.0%,血清变种3/14 (serovars 3/14) 64例, 占16.7%, 血清变种6 (serovar 6) 29例,占7.6%;生物变种2 亚型1 (subtype 1) 25例,占6.5%, 亚型2 (subtype 2) 30例,占7.8%, 亚型3 (subtype 3) 10例,占2.6%. 结论 Uu是性病的重要病原体,MBA多带抗原PCR基因分型鉴定具有简便、快速、敏感、特异之优点.
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解脲支原体3血清型和14血清型多带抗原B细胞表位预测
目的 预测解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,Uu3和14血清型多带抗原(multiple banded antigen,MBA)的优势B细胞表位和Th表位.方法 利用GOR4和HNN方法预测Uu3和Uu14血清型MBA的二级结构,结合其跨膜区域、亲水性、极性、柔韧性、表面可能性和抗原性等方面特征,预测其优势B细胞表位;同时筛选MHC-Ⅱ类限制性Th表位.合成4个富含B/Th细胞多表位肽,免疫小鼠评价其免疫原性.结果 Uu3血清型和14血清型MBA的B、Th表位具有高度同源性,其共同的富含B/Th细胞抗原表位位于N端31-51、55-75、97-115和154-168肽段.MBA aa31～51( F1)、MBA aa 55～75( F2)、MBA aa 97～115( F3)及MBA aa 154～168(F4)4个多表位肽具有良好的免疫原性,其诱导产生的特异性抗体明显高于PBS对照组(P<0.01).结论 多参数预测Uu MBA B细胞优势表位可为MBA单克隆抗体的制备和Uu表位疫苗设计等研究提供理论依据.
