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多聚酶链反应-测序方法文献资料
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建立16SrDNA 的 PCR-SBT 法细菌鉴定及在败血症中的应用
目的：建立16S rDNA PCR测序（PCR‐SBT）方法快速鉴定败血症患者体内的细菌菌种。方法对5株标准菌株及临床常见的20属27种细菌进行16S rDNA保守序列PCR扩增，扩增产物经纯化后直接测序，并利用Blast软件从GenBank数据库中搜索相关菌株的16S rDNA序列，采用Clustal‐X软件进行多序列比对和同源性分析，以确定细菌的种属；同时对124例败血症患者进行血培养并与PCR‐SBT 法比较，探讨其在临床应用中的价值。结果所有细菌菌株通过PCR方法均获得约1500 bp的保守序列，经测序分析后5株标准菌株的序列与预期标准序列完全一致，27种临床分离株测序鉴定结果与生化鉴定结果一致；124例败血症患者中84例PCR法阳性，阳性率67．7％，显著高于血培养的30．6％（P＜0．01）。结论建立16S rDNA的PCR‐SBT法鉴定细菌快速可靠，诊断败血症优于传统的血培养法。
关键词： 16S rDNA 多聚酶链反应-测序方法 败血症
