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自由基损伤和β2糖蛋白1在自身免疫疾病中的作用
目的研究被自由基氧化修饰的β2糖蛋白1(β2GP1)在自身免疫疾病中自身抗体产生中的作用. 方法采用高氯酸沉淀,两步肝素连接的交联琼脂糖凝胶层析结合葡聚糖凝胶G-100分离纯化大鼠β2GP1;应用自由基氧化修饰大鼠β2GP1;氧化修饰的β2GP1(oxβ2GP1)、β2GP1分别加与不加心磷脂(CL)及CL免疫大鼠,ELISA方法检测免疫大鼠血清中抗β2GP1抗体和抗心磷脂抗体(ACA). 结果两步亲和层析结合凝胶过滤层析有效地分离纯化了大鼠β2GP1,蛋白纯度达90.78%;通过羰基含量测定证实了自由基对β2GP1的氧化修饰;oxβ2GP1加CL、β2GP1加CL、oxβ2GP1免疫组与空白对照组、实验对照组比较ACA水平有显著升高(P<0.001),oxβ2GP1加CL免疫组与β2GP1加CL免疫组比较ACA水平差异有显著性(P<0.05);oxβ2GP1免疫组与oxβ2GP1加CL免疫组比较ACA水平差异不显著(P>0.05);oxβ2GP1加CL、oxβ2GP1免疫组与对照组比较,抗oxβ2GP1抗体水平有显著升高(P<0.05). 结论两步肝素连接的交联琼脂糖凝胶层析结合葡聚糖凝胶G-100能有效地分离纯化β2GP1;oxβ2GP1诱导了ACA和抗oxβ2GP1抗体的产生;β2GP1可能是自身免疫疾病发生过程重要的辅助因子或靶抗原,而自由基对β2GP1损伤可能是自身免疫疾病发病机制中的一个重要病理过程.