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应用压电生物传感器检测HBV感染相关SNP位点的实验研究
目的 建立压电生物传感器单核苷酸多态性(SNP)检测方法 ,检测乙型肝炎病毒(HBV)感染相关SNP位点ESRI T29C,期望为临床提供一种准确、可靠、快速、简便的SNP检测方法 .方法 以合成DNA序列target-A和target-G为检测靶序列,建立压电传感器检测SNP的模式实验,并确定低检测灵敏度;收集临床患者外周血样本,提取基因组DNA,经测序方法 鉴定SNP位点基因型,对不同基因型样本ESRI T29C位点所在片段进行PCR扩增后,应用压电生物传感器进行检测.结果 检测靶序列为target-A时,频率下降(416.0±21.5)Hz;检测靶序列为target-G时,频率下降(9.4±5.0)Hz,两者频率下降值差异有统计学意义(P＜0.01),并低可检测到2×10-11mol/L,以基因组DNA PCR扩增产物为检测靶序列时,基因型TT频率下降(109.4±13.4)Hz;TC型频率下降(52.0±11.4)Hz;CC型频率下降(7.2±4.5)Hz,3者频率下降值差异有统计学意义(P＜0.05).结论 该方法 能够特异、灵敏地检出临床标本中SNP位点的不同基因型.
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压电生物传感器的原理及其在生物医学检验中的应用
传统的检测微生物病原的办法耗时且敏感性不高,因此人类急需更快速、灵敏和精确检测微生物的方法与设备.在过去数十年里,大量的研究都集中在开发可快速实时检测微生物的生物传感器上[1].
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蛋白质-DNA相互作用压电阵列传感器的构建及应用
目的 建立一种蛋白质-DNA相互作用的新型压电生物传感器检测平台,并应用于NF-κB p65蛋白的实时检测.方法 AT切型基频10 MHz的镀金膜正方形石英晶体晶片作为传感元件,制作2×5型传感器检测微阵列,巯基修饰的NF-κB顺式作用元件序列探针通过分子自组装技术固定在阵列各检测池的金膜电极上,实时检测NF-κB的p65结合亚基浓度.结果 构建的蛋白质-DNA传感器在气相条件下,检测频率在30 min内的变化为±1 Hz,液相条件下检测频率变化为±2 Hz;随着蛋白浓度的增加,p65蛋白与DNA探针结合反应所引起的传感器频率变化逐渐增加,当蛋白浓度为40 ng/μl时,频率变化响应值大.结论 成功构建了蛋白质-DNA相互作用新型压电生物传感器检测平台,并实现了对NF-κB p65的实时检测.
