首页 > 文献资料
-
重组活性Ⅶ因子抢救严重产科出血三例临床报道
临床上经常出现危机生命的出血,如产科出血,外伤性出血、术中出血、DIC等,寻找一快速有效的止血方法,是挽救患者生命的关键所在.目前国际上推荐,上述诸多原因引起的出血,在传统治疗效果不好时,应用重组人凝血因子VIIa.其在短期内即可解决或改善出血的情况.重组活性Ⅶ因子(recombinant factor Ⅶa,rFⅦa),是一种维生素K依赖性糖蛋白,它由406个氨基酸残基组成,在结构上与人血浆纯化活化Ⅶ因子(pdFⅦa)相似.正常人血浆中FⅦ的浓度很低,仅为0.2～2.0mg/L,其血浆半衰期为6～8 h.rFⅦa是仓鼠肾(BHK)细胞在小牛血清中培养、纯化的一种基因工程产品,虽然它与pdFⅦa在结构上略有不同,但二者的生物学功能是完全一致的.在短期内可以起到止血的作用.
-
荧光定量PCR法测定重组人/门冬胰岛素原料中宿主DNA的残留量
目的:利用wako DNA提取试剂盒结合荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术,建立重组人/门冬胰岛素原料中宿主DNA残留量测定的方法并进行验证,用于对该产品进行质量控制.方法:通过wako DNA提取试剂盒提取重组人/门冬胰岛素原料中的宿主残留DNA,再利用SYBRGreen染料法对样品和标准DNA进行定量PCR测定,根据标准曲线对样品中的DNA残留量进行分析.对建立的方法进行引物特异性以及结果准确性和精密性验证,同时对本室留样的3批重组人胰岛素原料和3批重组门冬胰岛素原料中的残留DNA进行测定.结果:该方法检测酿酒酵母菌基因组DNA的低准确定量质量浓度可达0.137 8 ng· mL-1,DNA质量浓度在0.137 8～137 800 ng·mL-1范围内,其质量浓度的对数值与Ct值呈良好线性关系,标准曲线的相关系数(r)为0.994;DNA提取试剂盒提取不同量的加标样品回收率均在50％～200％范围内;该方法检测3批重组人胰岛素原料和3批重组门冬胰岛素原料中的DNA残留量均小于10 ng·剂量-1,符合进口药品注册标准中关于重组人/门冬胰岛素原料中宿主DNA残留量的要求.结论:wako DNA提取试剂盒能解决重组人/门冬胰岛素原料中样品前处理的技术难点,与定量PCR法结合能够简便、快速、准确地对重组人/门冬胰岛素原料中残留的DNA进行定量测定.
