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In Situ PLA技术文献资料
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In Situ PLA技术原位分析MTA1与NuRD复合体其他组分的相互作用
目的：原位检测肿瘤转移相关蛋白MTA1与NuRD复合体其他组分-Mi2、HDAC2及MBD3的相互作用并分析MTA1/NuRD复合体在HCT116细胞中的分布情况。方法首先利用co-IP技术体外验证MTA1与NuRD复合体其他组分Mi2、HDAC2及MBD3在HCT116细胞裂解液中的相互作用。然后利用In Situ PLA技术，体内原位检测MTA1与三者的相互作用，并根据镜下阳性荧光信号数目，比较MTA1与Mi2、HDAC2及MBD3之间的作用强弱；根据相互作用位点的亚细胞分布情况，分析间期及M期MTA1/NuRD复合体的核质分布情况。结果首次从体内原位水平证实MTA1与NuRD复合体其他组分-Mi2、HDAC2及MBD3的相互作用；其作用强度HDAC2高，Mi2次之，MBD3弱；首次发现MTA1/NuRD复合体存在很明显的胞质分布（约占总量的1/4）；另外，我们还首次发现在M期MTA1/NuRD复合体不再位于核区，而是位于染色体外周。结论In Situ PLA技术是一项有效的原位检测蛋白相互作用的新技术；MTA1/NuRD复合体可能参与MTA1胞质中功能的发挥；并且其胞质分布可能参与M期进程调控。
关键词： MTA1 NuRD复合体 相互作用 In Situ PLA技术
