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BRMS1基因对卵巢癌细胞侵袭转移作用及其机制的探讨
目的:研究BRMS1基因对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞侵袭、转移的作用及可能机制.方法:应用脂质体介导法将BRMS1-siRNA转染人卵巢癌细胞株OVCAR3细胞内(实验组),设转染不干扰任何基因的NC-siRNA的OVCAR3细胞为阴性对照组,未进行任何转染的为空白对照组.BRMS1基因有效沉默后,用Transwll侵袭、迁移实验检测OVCAR3细胞侵袭、迁移能力的变化,并采用蛋白质印迹法及免疫细胞化学法检测蛋白NF-kB p65、uPA表达的变化.结果:人卵巢癌细胞OVCAR3中BRMS1基因成功沉默.Transwell侵袭实验中,实验组转入底层膜的细胞数[(190士8.5)个]明显高于阴性对照组和空白对照组[分别为(144±7.8)和(146±6.8)个,P<0.05].Transwell迁移实验中,实验组转入底层膜的细胞数[(231±8.9)个]明显高于阴性对照组和空白对照组[分别为(177±9.7)和(182±7.9)个,P<0.05].在实验组中NF-kBp65、uPA蛋白表达均显著增强.结论:BRMS1基因可抑制卵巢癌细胞的转移,机制可能与NF-kB信号转导通路有关,通过抑制NF-kB的表达,下调uPA的表达,从而实现抑制卵巢癌的远处转移.
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应用RNAi技术研究乳腺癌转移抑制基因1对卵巢癌细胞侵袭转移的影响
目的 研究乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)对人类卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞侵袭、转移的影响.方法 应用脂质体介导法将BRMS1-siRNA转染人卵巢癌细胞株OVCAR3细胞内(实验组),设转染不干扰任何基因的Nc-siRNA的OVCAR3细胞为阴性对照组,未进行任何转染的为空白对照组.通过实时荧光定量PCR及免疫印迹法筛选并鉴定BRMS1基因有效沉默后,用Transwell侵袭、迁移实验检测BRMS1基凶沉默前后3组细胞侵袭、迁移能力的,变化.结果 人卵巢癌细胞OVCAR3中BRMS1基因成功沉默.BRMS1基因沉默后,Transwell侵袭实验中,实验组转入底层膜的细胞数为(190±8.5)个,明显高于阴性对照组和空白对照组[分别为(144±7.8)个、(146±6.8)个;t=8.747,t=8.869;P=0.000],Transwell迁移实验中,实验组转入底层膜的细胞数为(231±8.9)个,明显高于阴性对照组和空白对照组[分别为(177±9.7)个、(182±7.9)个;t=9.314,t=9.224;P=0.000].结论 BRMS1基因能抑制人类卵巢癌细胞的侵袭和转移,有望成为卵巢癌治疗的靶基因.
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转移抑制基因BRMS1对卵巢癌细胞侵袭能力的影响
目的研究转移抑制基因BRMS1对高转移性人卵巢上皮癌细胞(HO-8910PM)侵袭能力的影响.方法脂质体介导将重组真核表达质粒pcDNA3.0-BRMS1转染HO-8910PM细胞;RT-PCR检测转染前后细胞中BRMS1mRNA的表达;Boyden小室法检测细胞侵袭能力.结果与未转染细胞(HO-8910PM)和pcDNA3.0空质粒转染细胞(HO-8910PM-vect)相比,BRMS1基因转染细胞(BRMS1.c2)侵袭穿透Matrigel基质膜的细胞数降低70.6%(P<0.001).结论BRMS1基因能抑制卵巢癌细胞HO-8910PM的侵袭能力,为进行卵巢癌基因治疗提供了实验依据.
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鼻腔鼻窦恶性肿瘤中BRMS1基因蛋白表达的研究
目的:以鼻腔鼻窦恶性肿瘤为研究对象,探讨肿瘤转移抑制基因BRMS1在其发生、发展和转移中的作用及临床意义.方法:采用免疫组织化学SP法分别检测53例鼻腔鼻窦恶性肿瘤组织、24例鼻息肉组织及10例正常组织中BRMS1基因蛋白的表达,分析在不同临床病理指标下BRMS1蛋白表达的情况.结果:BRMS1蛋白在正常组织中的阳性表达率(90.0%)及息肉组织中的阳性表达率(79.2%)均显著高于癌组织中的阳性表达率(39.6%),差异均有统计学意义(均P<0.01).癌组织中BRMS1蛋白阳性表达率与临床分期和淋巴结转移有关,与病理分级无关.结论:鼻腔鼻窦恶性肿瘤的发生、发展和转移与BRMS1基因的失活密切相关.