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直接底物文献资料
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胱天蛋白酶酶解BAG3蛋白的体外研究
目的:探讨BAG3是否为胱天蛋白酶的直接作用底物.方法:选取人胰腺癌细胞SW1990,分别设培养液处理空白对照组、蛋白酶体抑制剂MG132单独或与胱天蛋白酶抑制剂z-YVAD、z-DEVD、z-IETD或z-LEHD联合处理；利用重组胱天蛋白酶对重组BAG3蛋白进行体外酶解；蛋白质印迹法检测各组细胞中BAG3蛋白的裂解情况.结果:在体外,2 mol/L胱天蛋白酶1抑制剂z-YVAD和2 mol/L胱天蛋白酶8抑制剂z-IETD可以部分抑制,2 mol/L胱天蛋白酶3抑制剂z-DEVD可以完全抑制,而胱天蛋白酶9抑制剂z-LEHD不能抑制MG132诱导的BAG3裂解；在胱天蛋白酶的体外酶切实验中,重组胱天蛋白酶1、3和8可以裂解BAG3,而胱天蛋白酶9不能剪切BAG3.另外,胱天蛋白酶3裂解BAG3的效率高,0.1 mol/L胱天蛋白酶3即可以对BAG3进行剪切,0.5 mol/L胱天蛋白酶3可以完全酶切BAG3.结论:BAG3是胱天蛋白酶的直接作用底物,胱天蛋白酶3是执行BAG3裂解的主要胱天蛋白酶.
