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免疫金纳米笼子介导热疗诱导人乳腺癌细胞凋亡研究
目的:研究抗体修饰的金纳米笼子对乳腺癌细胞的光热杀伤作用.方法:由银(Ag)立方纳米晶与次氯金酸(HAuCl4)置换反应得到金纳米笼子,经Anti-CK19抗体修饰后制成具有生物靶向性的免疫金纳米笼子.将其链接细胞后,由激光照射,在荧光显微镜下观察免疫金纳米笼子光热杀伤乳腺癌细胞的效果,通过流式细胞仪检测其对乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231和MCF-7/TMA热疗效果的差异,用免疫组化方法检测热疗后细胞内Caspase-9蛋白的表达量,MMT比色法观察其细胞毒性.结果:免疫金纳米笼子可以通过光热作用来杀伤乳腺癌细胞;MCF-7细胞株对照组凋亡率为(0.056±0.007 8)％,实验组为(50.2±4.56)％,MCF-7/TAM细胞株对照组凋亡率为(0.006 3±0.005 4)％,实验组为(52.6±5.07)％,MDA-MB-231细胞株对照组凋亡率为(0.054±0.006 4)％,实验组为(49.0±4.81)％,差异无统计学意义,F=0.84,P=0.456;Caspase-9蛋白在37℃时表达水平为0.06±0.02,41℃表达水平为0.15±0.04,43℃表达水平为0.34±0.04,对照组光照后温度为34℃,表达水平为0.05±0.01,＜43℃时,随着温度的升高Caspase-9的表达量明显升高,F=14.914,P＜0.001;MMT法结果显示,高剂量免疫金纳米笼子可抑制乳腺癌细胞的增殖(F=5.774,P＜0.001),且存在时间-效应(F=42.378,P＜0.001)和剂量-效应(F=76.440,P＜0.001)关系.结论:免疫金纳米笼子介导的光热疗法可以靶向杀伤乳腺癌细胞,上调Caspase-9的表达,是免疫金纳米笼子介导的热疗诱导乳腺癌细胞凋亡的机制之一.
