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毛细血管扩张共济失调突变基因文献资料
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靶向沉默ATM基因对人肺腺癌A549细胞放射敏感性影响
目的 探讨质粒介导RNA干扰抑制ATM基因表达对人肺腺癌A549细胞放射敏感性影响.方法 构建ATM基因小分子干扰RNA (siRNA)真核表达质粒pSilencer2.1-ATM并转染A549细胞(阳性组),转染pSilencer2.1-nonspecific质粒为阴性组,未转染为对照组.RT-PCR和蛋白印迹法分别检测ATM基因mRNA及蛋白表达,细胞克隆形成实验观察细胞放射敏感性变化,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡.结果 成功构建了ATM基因siRNA真核表达质粒.RT-PCR和蛋白印迹法证实阳性组细胞ATM基因表达下调,阳性组、阴性组的放射增敏比(D0值比)分别为1.50、1.01,流式细胞仪检测显示阳性组G1、G2 +M期细胞比例减少[51.27％∶ 61.85％ (P =0.012)、6.34％∶ 10.91％(P=0.008)],细胞凋亡率则高于对照组、阴性组[49.31％∶ 13.58％ (P=0.000)、49.31％∶ 13.17％(P=0.000)].结论 ATM基因沉默可增加A549细胞的放射敏感性,其机制可能与细胞周期变化及凋亡有关.
关键词： 毛细血管扩张共济失调突变基因 RNA干扰 细胞系 肺腺癌 放射敏感性
