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荧光定量聚合酶链反应检测大肠癌患者外周血癌细胞角蛋白20 mRNA
目的 探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测大肠癌患者外周血癌细胞角蛋白20 mRNA(CK20 mRNA)的表达水平及临床价值.方法 采用FQ-PCR法测定136例结直肠癌及其肝脏转移患者外周血癌细胞CK20 mRNA的表达水平,系统研究了FQ-PCR法测定CK20 mRNA的重复性、定量范围和扩增效率,分析比较其与传统RT-PCR、免疫组化法检测结果的一致性.结果 FQ-PCR法测定CK20 mRNA的批内CV为3.6%,批间CV为5.3%,定量范围为103～108 copies/ml,扩增效率为87.4%.与传统RT-PCR和免疫组化法相比较,Kappa值分别为0.87和0.83.结直肠癌患者外周血癌细胞CK20 mRNA的表达水平为(3.52×104±1.47×104)copies/ml,表达阳性率为48.5%;75例对照者均无CK20 mRNA表达.Dukes A、B、C、D期大肠癌患者外周血癌细胞CK20 mRNA的阳性率分别为9.5%、25.0%、48.8%和87.5%,各组间差异有统计学意义(P＜0.05).肝脏转移者CK20 mRNA阳性率为87.5%,显著高于肝脏无转移者(32.3%,P＜0.05).35例结直肠癌患者术后1、3、5 周内CK20 mRNA表达水平呈下降趋势,但术后1、3 周与术前比较,差异无统计学意义(P＞0.05),术后5周显著低于术前(P＜0.05).结论 FQ-PCR是较灵敏的快速定量检测CK20 mRNA的方法.大肠癌患者外周血癌细胞CK20 mRNA的表达与肿瘤的复发和转移有关,CK20 mRNA检测将有助于大肠癌血源性播散的监测.
关键词： 荧光定量聚合酶链反应 细胞角蛋白20 mRNA 结肠直肠肿瘤 -
胃窦癌肝十二指肠韧带淋巴结微转移与清扫
目的 检测进展期胃窦癌肝十二指肠韧带淋巴结微转移状况,探讨进展期胃窦癌根治术肝十二指肠韧带淋巴结清扫的必要性.方法 采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,以细胞角蛋白20(CK20)mRNA为标志基因,对45例进展期胃窦癌患者的86枚肝十二指肠韧带淋巴结标本进行检测.结果 45例进展期胃窦癌患者有23例出现肝十二指肠韧带淋巴结CK20阳性(51.11%),与常规病理检查相比,存在显著性差异(P＜0.01);常规病理检查阴性的86枚淋巴结有46枚CK20阳性(53.49%),亦存在显著性差异(P＜0.01).肝十二指肠韧带淋巴结微转移与临床分期、浸润深度以及肿瘤分化程度显著相关.结论 RT-PCR技术检测CK20 mRNA是诊断胃窦癌淋巴结微转移敏感而特异的方法,进展期胃窦癌根治术应包括肝十二指肠韧带淋巴结的清扫.
关键词： 胃窦癌 肝十二指肠韧带淋巴结 细胞角蛋白 微转移 细胞角蛋白20 mRNA RT-PCR -
巢式逆转录多聚酶链反应检测大肠癌外周血中CK20 mRNA
目的：研究大肠癌患者外周血中CK 20 mRNA作为大肠癌细胞微转移的标志 。方法：巢式逆转录多聚酶反应（RT-PCR）法。结果：CK 20 mRNA巢式RT-PCR低可检测到每5ml血液中仅存5个结肠癌细胞的存在；大肠癌组32例 , 外周血中CK 20 mRNA阳性率56.26%（18/32）；对照组中CK 20 mRNA均为阴性。结 论：CK 20 mRNA巢式RT-PCR可作为大肠癌细胞微转移的敏感而特异的检测方法。
关键词： 细胞角蛋白20 mRNA 大肠肿瘤 外周血液
