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新基因1A6定位及在肿瘤中的双色荧光原位杂交分析
目的了解定位新基因1A6在不同组织来源肿瘤中的状态.方法用单色FISH法将载于质粒的1A6基因小片段cDNA定位于C组某一染色体长臂, 根据该基因测序结果设计8对引物,通过PCR在PAC文库中筛选目的基因的基因组DNA.用切口翻译法分别用红绿荧光直接标记12号α-卫星重复序列和1A6基因组DNA,采用双色荧光共杂交的方法定位1A6基因,并对其及12号染色体进行了数量分析.结果 1A6基因定位于12q23.2-23.3.1A6基因在乳腺癌、卵巢癌及胃癌细胞株中双色FISH的绿红信号比(R值)为0.96~1.01,在胃癌组织印片中R值为0.93~1.11.12号染色体在乳腺癌细胞株BMI中的双体率87.7%,三体率7.4%;在卵巢癌细胞株SKOV3中的多体率100%,其中五体率67.6%;在胃癌细胞株BGC823中的多体率为83.1%,其中三体率为71%.在实体瘤胃癌组织印片中,86.4%(19/22)的病例12号染色体以双拷贝为主.结论 1A6基因在实体瘤胃癌组织及肿瘤细胞株(BGC823、SKOV3、BMI)中均无明显扩增和缺失,推测其在肿瘤中的作用方式不是扩增或缺失.12号染色体数目在不同组织来源肿瘤细胞株中各异,意义有待探讨.