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Vav3基因对人胃癌 SGC7901细胞增殖能力的影响及其机制
目的：探讨Vav3基因对人胃癌SGC7901细胞增殖能力的影响及其机制。方法采用Western blot法检测胃癌SGC7901细胞、胃上皮GES－1细胞、胃癌组织和癌旁组织中Vav3蛋白的表达。将Vav3－siRNA转染胃癌SGC7901细胞，采用四甲基偶氮唑蓝法检测胃癌细胞的增殖，流式细胞术检测细胞周期，实时荧光定量PCR和Western blot法检测增殖相关基因增殖细胞核抗原（ PCNA）、p16、cyclin D1和Rb的表达。制作胃癌原位移植瘤裸鼠模型，检测各组裸鼠的肿瘤生长情况及肿瘤组织中PCNA、p16、cyclin D1和Rb蛋白的表达。结果 Vav3蛋白在胃癌组织和癌旁组织中的相对表达量分别为0．910±0．242和0．243±0．045；在胃癌SGC7901细胞和胃上皮GSE－1细胞中的相对表达量分别为0．925±0．127和0．277±0．038，差异均有统计学意义（均P＜0．05）。 Vav3－siRNA转染可成功抑制SGC7901细胞中Vav3蛋白的表达。以80 nmol／L Vav3－siRNA转染SGC7901细胞72 h后， SGC7901细胞的增殖抑制率达（83．43±10．17）％。 Vav3－siRNA转染后，SGC7901细胞中G0／G1期细胞比例增加，S期细胞明显减少（ P＜0．05）；PCNA和cyclin D1的表达明显下降，而p16和Rb的表达则明显升高（均P＜0．05）。 Vav3－siRNA转染可明显抑制裸鼠肿瘤的生长，并使肿瘤组织中PCNA、cyclin D1蛋白的表达下降，p16和Rb蛋白的表达升高（P＜0．05）。结论 Vav3通过调节增殖相关基因的表达促进胃癌细胞的增殖。
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Vav3对人胃癌细胞株BGC823血管生成基因的调节作用及意义
背景与目的:研究发现Vav3基因在多种恶性肿瘤中表达异常,但Vav3与胃癌血管生成的关系尚不明确.本研究通过抑制内源性Vav3,观察其对胃癌细胞血管生成基因表达的影响,并探讨其机制和意义.方法:荧光定量RT-PCR及蛋白质印迹法(Western blot)检测人胃癌细胞株BGC823、胃上皮细胞株GES-1中Vav3的表达;合成针对Vav3的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA),并转染胃癌细胞株BGC823;MTT法检测转染前后胃癌细胞的活性;检测转染前后BGC823血管生成相关基因血管内皮生长因子-A(vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)、VEGF-C、VEGF-D、血管生成素-2(angiogenin-2,Ang-2)、血管生成抑制蛋白-1 (vasohibin-1)表达的变化.结果:Vav3在胃癌BGC823细胞中的表达明显高于胃上皮细胞株GES-1(P＜0,01); Vav3-siRNA转染BGC823细胞后,Vav3表达明显受到抑制(P均＜0.01);MTT结果显示Vav3-siRNA转染后,BGC823活性明显降低(P＜0.05);转染后BGC823中VE GF-C和Ang-2表达均较转染前降低(P均＜0.05),而vasohibin-1表达则升高(P均＜0.05).结论:Vav3对部分胃癌细胞血管生成相关基因有调控作用,并可能通过这种作用促进肿瘤血管生成.
