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弗林蛋白酶抑制剂对乳腺癌MCF-7细胞生长和迁移的影响
目的 探讨乳腺癌转移的机制,为深入研究乳腺癌发生、发展机制提供理论基础.方法 应用不同浓度的弗林蛋白酶(Furin)抑制剂α1-PDX处理乳腺癌MCF-7细胞.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)和克隆形成实验检测Furin抑制剂对MCF-7细胞增殖和克隆形成的影响.单层细胞迁移实验和Transwell实验检测MCF-7细胞迁移和浸润能力.Hoechst 33342/PI双染法检测细胞凋亡.酶联免疫吸附法检测细胞培养液中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白水平.Western blot检测细胞迁移相关蛋白MT1-MMP、血管内皮生长因子(VEGF)-C和VEGF-D水平.结果 不同浓度α1-PDX作用MCF-7细胞48 h以上时,细胞的生长受到抑制,集落形成降低,细胞凋亡率升高.但在低浓度情况下对细胞迁移和侵袭起抑制作用.α1-PDX降低了细胞内MT1-MMP、VEGF-C、VEGF-D的表达,同时细胞培养液上清中MMP-2和MMP-9浓度也低于对照组.结论 Furin抑制剂通过抑制乳腺癌MCF-7细胞MMP及VEGF表达抑制肿瘤的迁移能力.
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弗林蛋白酶抑制剂对乳腺癌细胞MCF-7迁移的影响
目的：探讨乳腺癌转移的机制，为深入研究乳腺癌发生、发展机制提供理论基础。方法：不同浓度的弗林蛋白酶（ furin）抑制剂处理人乳腺癌细胞MCF-748 h。细胞划痕实验（ wound healing assay）和细胞趋化实验（ Transwell assay）检测MCF-7细胞迁移和侵袭能力。 Western blotting检测细胞迁移相关蛋白膜型基质金属蛋白酶1（ MT1-MMP）、血管内皮生长因子（ VEGF）-C和VEGF-D水平。酶联免疫吸附法（ ELISA）检测细胞培养液中基质金属蛋白酶（MMP）2和9水平。结果：与对照组相比，200 nmol／L的furin抑制剂α1-PDX即对细胞迁移及侵袭起显著抑制作用（均P＜0.05）；细胞迁移相关的MT1-MMP、VEGF-C和VEGF-D表达水平均显著降低（ P＜0.05）；MCF-7细胞上清液中MMP2和 MMP9的表达均显著降低（ P＜0.05）。结论： Furin抑制剂通过下调乳腺癌细胞MCF-7的MMPs及VEGFs表达抑制其迁移。
