首页 > 文献资料
-
微小RNA-218靶定SOX5对胶质瘤细胞生长和侵袭的影响
目的 观察微小RNA-218(miR-218)靶定SOX5对胶质瘤细胞生长和侵袭的影响.方法 培养U87胶质瘤细胞株,将其分为对照组、无义序列组和miR-218转染组.取40例胶质瘤组织标本,35例正常脑组织.利用生物信息学方法、荧光素酶报告系统验证SOX5是miR-218的直接作用靶点.通过RT-PCR和Western blot方法检测U87细胞、胶质瘤组织及其正常脑组织中miR-218对SOX5 mRNA和蛋白表达的影响.在U87细胞中过表达miR-218后,利用MTT实验、Tanswell实验检测U87细胞表型的变化.利用RNA干扰技术沉默SOX5,利用MTT实验、Tanswell实验检测U87细胞表型的变化.结果 与对照组、无义序列组比较,miRNA-218转染组的miRNA-218相对表达量升高42.2倍;MTT法结果显示,过表达miRNA-218后,胶质瘤细胞生长明显受到抑制,第5天细胞增殖率仅为49.2％;Transwell法结果显示,miRNA-218组穿过Transwell小室的细胞数为(13.0±2.1)个,低于对照组和无义序列组的(35.0±2.3)个和(32.0±3.1)个(均P ＜0.05).生物学信息预测SOX5是miR-218的靶基因之一,在SOX5 3'端非编码区含有miR-218的结合位点;双荧光素酶实验提示,SOX5为miR-218的直接作用靶点.过表达miR-218后,RT-PCR和Western blot检测显示,miR-218转染组SOX5 mRNA和蛋白的表达明显低于对照组和无义序列组,差异有统计学意义(P＜0.01).与正常脑组织比较,胶质瘤组织中miRA-218 mRNA的相对表达量降低,而SOX5 mRNA相对表达量升高(P＜0 01).沉默SOX5后,MTT法结果显示,细胞培养第5天,SOX5沉默[小干扰RNA(siRNA)-SOX5]组细胞增值率仅为siControl(无序列)组的51.0％;Transwell法分析显示,SOX5沉默组穿过Transwell小室的细胞数为(12.0±1.3)个,低于siControl组的(23.0±2.0)个(P＜0.05).结论 SOX5是miR-218的靶基因,并受其负向调控.miR-218可能通过靶定SOX5在胶质瘤的发病机制中起重要作用.
-
miR-218靶定SOX5对胶质瘤细胞生长的影响
目的 观察micro RNA-218(miR-218)靶定SOX5对胶质瘤细胞生长的影响.方法 首先利用生物信息学方法、荧光素酶报告系统验证SOX5是miR-218直接作用靶点.通过RT-PCR和Western blot方法检测胶质瘤细胞系、胶质瘤组织及其瘤旁正常脑组织中miR-218对SOX5的mRNA和蛋白水平的影响.然后在胶质瘤U87细胞系中,过表达miR-218后利用MTT检测胶质瘤细胞系表型的变化.结果 利用生物信息学预测出基因SOX53,UTR含有miR-218的结合位点,荧光素酶报告结果进一步证实miR-218靶定SOX5.RT-PCR结果显示,与正常脑组织相比,胶质瘤组织内miR-218的表达明显降低,而SOX5的mRNA明显增高.MTT结果显示,在U87细胞系中,过表达miR-218后,细胞生长活性下降,沉默SOX5后胶质瘤细胞的增殖活性都明显下降.结论 SOX5是miR-218的直接作用靶点,miR-218有可能通过抑制SOX5基因的表达发挥抑癌基因的作用.
-
SoxD家族基因与肿瘤发生发展关系的研究进展
Sox基因家族是一类具有高度保守序列的转录因子编码基因,其D亚族中主要成员Sox5和Sox6参与调控胚胎发育、神经生长、软骨形成等生长发育过程.近年来关于SoxD亚族与肿瘤的研究逐渐增多,显示SoxD亚族在不同肿瘤类型中发挥着促癌或抑癌的作用;同时D家族成员的表达差异还可以用于鉴别诊断或作为肿瘤预后的分子标记物.本文介绍SoxD亚族中Sox5和Sox6基因结构及功能,并重点阐述两者在肿瘤发生发展中的意义及相关研究进展.
