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敲低转录共激活子对胶质瘤细胞生物学特性的影响
目的 研究敲低带PDZ结合域的转录共激活子(transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,TAZ)表达后对胶质瘤细胞株细胞生物学特性的影响.方法 采用TAZ小干扰RNA(TAZsiRNA)敲低LN229和SNB19细胞株中TAZ表达,用实时定量聚合酶链式反应(real time-PCR) 及蛋白免疫印迹法(Western blot)分别鉴定转染后TAZ敲除效果,噻唑兰比色法检测两种细胞株的增殖能力变化;流式细胞术检测细胞凋亡的改变;划痕实验和Transwell实验检测细胞侵袭能力的变化;Western blot法检测凋亡、增殖及侵袭等相关蛋白的表达变化.结果 转染TAZ siRNA可显著敲低LN229和SNB19细胞株中TAZ mRNA及蛋白表达水平;两种细胞株中TAZ被抑制后,细胞增殖率均下降且呈逐渐下降趋势,而细胞凋亡率分别增高至(12.05±0.65)％和(8.02 ±0.66)％(LN229:F=414.2,P=0.000;SNB19:F=156.8,P=0.000);两细胞株TAZ siRNA组细胞穿膜细胞数与对照组和无义序列组相比明显降低,划痕间隙融合能力也显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);Western blot法检测显示转染后细胞增殖核抗原(Kiel 67 antigen,Ki-67)、B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、基质金属蛋白酶9(matrix metallopeptidase 9,MMP-9)等增殖、凋亡及侵袭相关蛋白表达明显下调.结论 敲低TAZ可抑制胶质瘤细胞株LN229和SNB19增殖和侵袭能力,提示TAZ可能成为治疗胶质瘤的新靶点.
关键词： 神经胶质瘤 细胞增殖 肿瘤侵润 凋亡 带PDZ结合域的转录共激活子
