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重构型Caspase-3对人脑胶质瘤抑瘤效应的实验研究
目的 探讨重构型Caspase-3对裸鼠皮下人脑胶质瘤生长的影响.方法 用脂质体包裹法将重构型Caspase-3基因的真核表达载体pcDNA-Rev-Caspase-3注入裸鼠皮下SHG 44人脑胶质瘤内,观察肿瘤生长情况并计算抑瘤率,结合病理组织学、电镜确定重构型Caspase-3对人脑胶质瘤的作用.结果 重构型Caspase-3在荷瘤裸鼠瘤体内获得表达,裸鼠肿瘤生长受到抑制,抑瘤率达到46.1%.结论 重构型Caspase-3能够促进肿瘤凋亡,导致肿瘤细胞死亡,抑制人脑胶质瘤生长.为进一步研究胶质瘤的基因治疗打下了基础.
关键词： 重构型Caspase-3 神经胶质瘤 细胞凋亡 裸鼠 -
重构型caspase-3的表达及其对SKBr3细胞的凋亡诱导作用
目的:探讨重构型caspase-3基因的表达对肿瘤细胞的凋亡诱导作用.方法:用重组PCR的方法获得大、小亚基顺序颠倒的重构型caspase-3基因并将其克隆入真核表达载体pcDNA3,转染乳腺癌细胞系SKBr3细胞,通过HE染色、流式细胞仪分析及免疫组化等方法观察其表达后对细胞的促凋亡活性,并将载体DNA直接注射荷瘤裸鼠研究其对肿瘤的抑制作用.结果:重构型caspase-3基因可在SKBr3细胞内表达,转染组较同期对照组出现明显的细胞死亡现象,pcDNA3-revcasp-3重组质粒直接注入对荷瘤裸鼠肿瘤生长有明显抑制作用.结论:重构型caspase-3基因表达可诱导SKBr3细胞凋亡.
关键词： 重构型Caspase-3 凋亡 SKBr3 -
GFP共表达的重构型Caspase-3基因对人成骨肉瘤细胞的凋亡诱导作用
目的探讨GFP共表达的caspase-3基因的表达对人成骨肉瘤细胞的凋亡诱导作用.方法应用DNA重组技术将重构型caspase-3基因亚克隆至带有GFP报告基因的真核表达载体pEGFP-C1中,脂质体介导转染人成骨肉瘤细胞SOSP-9901,通过RT-PCR方法检测转染后caspase-3基因的表达;荧光显微镜、电镜观察细胞形态学变化;MTT法检测转染caspase-3基因对SOSP-9901细胞生长的影响.结果 RT-PCR方法证实重构型caspase-3基因可在SOSP-9901细胞内表达,形态学观察显示转染组细胞较对照组出现明显细胞凋亡特征,MTT法结果表明caspase-3对SSOP-9901的细胞生长有抑制作用.结论重构型caspase-3对成骨肉瘤细胞SOSP-9901的生长有抑制作用,并可诱导成骨肉瘤细胞凋亡.
关键词： 重构型Caspase-3 凋亡 成骨肉瘤细胞 -
具有自发活性的重组caspase-3对裸鼠SKBr-3肿瘤生长的抑制
目的:探讨具有自发活性的caspase-3分子对乳腺癌肿瘤细胞凋亡的诱导作用. 方法:重构型caspase-3转染SKBr-3细胞后, 以观察细胞的形态、进行细胞计数和及流式细胞仪分析等方法, 验证caspase-3大、小亚基顺序颠倒的重构型caspase-3分子的促凋亡活性.将重组真核表达载体pcDNA3-revcaspase-3直接注射荷瘤裸鼠研究其对肿瘤生长的抑制作用, 间接免疫荧光染色法检测肿瘤组织中重构型caspase-3基因表达情况, 用TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡. 结果:重构型caspase-3基因转染后, 可诱导SKBr-3细胞凋亡, 将pcDNA3-revcaspase-3重组质粒直接注射荷SKBr-3瘤裸小鼠后, 肿瘤的生长明显受到抑制, 免疫组化染色可检出重构型caspase-3蛋白的表达; TUNEL法检测证实肿瘤细胞发生凋亡. 结论:重构型caspase-3基因的体内表达可诱导SKBr-3细胞凋亡.
关键词： 重构型Caspase-3 自发活性 凋亡
