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Ⅰ型艾滋病病毒CN54株文献资料
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HIV-1膜蛋白gp140三聚体疫苗的构建和免疫原性研究
目的 构建表达中国流行株HIV-1 CRF_07 B/C亚型(HIV-1 CN54)膜蛋白gp140和gp140FdFc三聚体疫苗,比较其免疫原性.方法 构建gp140和gp140FdFc重组质粒,将质粒分别瞬时转染293F细胞,120小时后收获上清液,经纯化、浓缩、PBS置换、BCA试剂盒检测蛋白质浓度后,利用SDS-PAGE电泳检测蛋白分子量大小及纯度,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其与阳性病人血清的反应性.通过肌肉注射的方式分别免疫兔子,取兔子血清,ELISA检测血清抗体,并通过假病毒系统检测血清中和抗体滴度,比较gp140和gp140FdFc的免疫原性.结果 成功获得基因重组gp140和gp140FdFc蛋白.免疫兔子后,gp140和gp140FdFc蛋白质均有很强的体液免疫应答,抗gp160抗体滴度分别为2.24×105和4.48×105,但gp140组未诱导出中和抗体,gp140FdFc组对4种假病毒具有一定的中和活性.结论 Gp140FdFc三聚体能诱导兔子产生较强的结合抗体和一定的中和抗体反应,可作为潜在的HIV-1免疫原进行疫苗研究.
关键词： Ⅰ型艾滋病病毒CN54株 疫苗 gp140三聚体 中和抗体
