首页 > 文献资料
-
氢氧化钙对人根尖牙乳头干细胞增殖的影响
目的:探讨氢氧化钙(calcium hydroxide,CH)对人根尖牙乳头干细胞(stem cells from apical papilla,SCAPs)增殖能力的影响.方法:运用酶消化法结合组织块贴壁法分离培养SCAPs并加以鉴定.根据CH浸提原液的浓度不同分为6个实验组,在培养后的第1、3、5、7、9天分别终止培养,利用MTT法检测其吸光度(A)值,并进行统计学分析.结果:与对照组比较,至第5天时,浓度为0.1％、0.5％、1.0％、5.0％组的SCAPs增殖比较差异无统计学意义(P>0.05),而浓度为10.0％和15.0％组已表现出对SCAPs增殖的抑制作用(P<0.05);到第7天和第9天时,所有实验组与对照组比较,均表现为对SCAPs的增殖抑制作用(P<0.05).结论:CH对人SCAPs的增殖起抑制作用,并且随着时间延长其抑制作用增强,而高浓度CH对人SCAPs增殖的抑制作用更为明显.
-
环磷酸腺苷反应元件结合蛋白调控转化生长因子β1对人根尖牙乳头干细胞分化的作用
目的 观察过表达第二信使环磷腺苷反应元件结合蛋白(cAMP-responsive element-binding protein,CREB)调控转化生长因子 β1(transforming growth factor-beta,TGF-β1)对人根尖牙乳头干细胞(human stem cells from the apical papilla,hSCAPs)分化的作用.方法 通过采用酶消化法培养hSCAPs,实验分成4组:①Control组,即正常矿化诱导液(α-MEM、10%FBS、10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠、50μg/ml维生素C、10 nmol/L地塞米松);②TGF-β1组,加入正常矿化诱导液后,加入5μg/mL TGF-β1;③TGF-β1+LV-empty组,除正常矿化诱导液外,加入转染空病毒载体和TGF-β1,TGF-β1浓度为5μg/mL;④TGF-β1+ov-CREB组,除正常矿化诱导液外,加入转染过表达CREB病毒载体和TGF-β1,TGF-β1浓度为5μg/mL.矿化培养2周后,通过茜素红染色观察各组矿化结节形成情况,实时荧光定量PCR法检测各组矿化相关基因,Runt相关基因2(runt-related tran-scription factor 2,RUNX2)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)和碱性磷酸酶(alkaline phospha-tase,ALP)mRNA的表达.结果 TGF-β1作用SCAPs后,与Control组(1.12±0.11)相比,抑制矿化结节的形成(0.67±0.12)(P<0.05);下调矿化基因RUNX2(0.60±0.03)、DSPP(0.43±0.12)、ALP(0.69±0.05)的mRNA表达(P<0.05).过表达CREB后逆转TGF-β1对SCAPs分化的抑制作用,与TGF-β1组相比,促进矿化结节的形成(1.27±0.10)(P<0.01)并上调RUNX2(1.33±0.07)、DSPP(1.32±0.11)和ALP(1.26±0.03)mRNA的表达(P<0.05).结论 过表达转录因子CREB能够逆转TGF-β1对hSCAPs分化的抑制作用,促进其分化.
-
根尖牙乳头干细胞成牙本质分化的研究进展
牙根的发育在牙冠发育即将完成之际开始,由成釉器的内釉上皮与外釉上皮在颈环处向未来根尖孔方向增生,形成上皮根鞘,进而启动牙根的发育.上皮根鞘生成之后,其内侧的牙乳头细胞也向根尖方向增生,牙乳头的外周细胞与上皮根鞘的基底膜紧密结合,使得牙乳头间质细胞分化成成牙本质细胞,后者形成原发性牙本质,将牙乳头包围起来并使其发育成为牙髓.2006年,W.Sonoyama等[1]从根尖未发育完全的年轻的第3磨牙根尖牙乳头组织中分离出了一种新的干细胞群,他们发现其不仅具有类似于间充质干细胞的特征,而且这类细胞的溴脱氧尿苷(brom0de0xyuridine,BrdU)吸收率非常高,并具有很强的端粒酶活性,他们将其命名为根尖牙乳头干细胞(stem cell from the apical papilla,SCAP).从根尖牙乳头中提取出的SCAP在牙根的发育过程中起着非常重要的作用,且在成牙分化过程中SCAP的分化潜能可被生长因子、机械刺激等多因素影响.SCAP不仅仅是研究牙根发育时非常重要的体外细胞,而且是一种非常好的牙组织工程种子细胞,具有极其良好且广阔的临床应用前景.我们基于SCAP目前在成牙本质分化中的相关研究进展做一综述.
-
血小板裂解液对人根尖牙乳头干细胞和牙周膜干细胞体内外增殖、矿化能力的影响
目的:研究血小板裂解液(Platelet Lysate,PL)在体内外对人根尖牙乳头干细胞(SCAP)和牙周膜干细胞(PDLSCs)增殖、矿化的干预效应,以期找到PL应用于这两种细胞的佳方式.方法:在矿化诱导培养体系中按一定体积比加入PL,分别作用于体内、外复合HA-TCP支架材料三维生长的SCAP和PDLSCs,扫描电镜(SEM)以及组织学观察细胞生长、分化情况.结果:体外三维培养模式下,PL能够促进SCAP和PDLSCs的增殖以及矿化细胞外基质的形成,并利于在支架材料上形成完整的细胞膜片(cell sheet)样结构,以上效应对于PDLSCs作用更为显著.而在体内移植模式下,经50 mL/L、10 mL/L PL培养体系预培养的SCAP能形成包含成牙本质细胞样细胞、牙本质样基质和牙髓组织的牙本质牙髓复合体样结构；而PDLSCs经50 mL/L PL干预后,可分化为成牙骨质细胞样细胞,并生成牙骨质样基质、牙周膜样组织.结论:一定体积浓度比的PL能促进SCAP和PDLSCs在体内外的增殖以及成骨、成牙本质分化.
-
bFGF对人根尖牙乳头干细胞成脂分化影响的研究
目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在体外对人根尖牙乳头干细胞(stem cellsfrom apical papilla,SCAP)成脂分化的影响.方法:采用酶消化法获得原代SCAP,用含有5 ng/mL bFGF的成脂诱导液对其诱导培养不同时间,显微镜观察细胞形态变化、油红0染色观察SCAP成脂分化能力、RT-PCR检测PPAR-γ2 mRNA表达情况.结果:SCAP在含有5 ng/mL bFGF成脂诱导液中培养3周,细胞中脂滴形成数量多于对照组,而且细胞密度也相对较大,细胞体积小,未见拉长、变大等现象.RT-PCR检测显示,诱导培养1周时,实验组与对照组PPAR-γ2 mRNA表达无显著性差异(P＞0.05);培养3周时,实验组PPAR-γ2 mRNA表达量明显高于对照组(P＜0.05).结论:bFGF具有促进SCAP成脂分化的潜能.
关键词： 碱性成纤维细胞生长因子 根尖牙乳头干细胞 成脂分化 -
人根尖牙乳头干细胞与非干细胞差异表达miRNAs谱及靶基因的功能分析
目的:比较人根尖牙乳头干细胞(SCAP)与非干细胞(非SCAP)之间差异表达的miRNAs,并进行功能预测分析.方法:采用酶消化法获得原代人根尖牙乳头细胞,用鼠抗人STRO-1单克隆抗体对其标记,用免疫磁珠分选系统获得SCAP和非SCAP.茜素红、油红O染色鉴定干细胞的分化能力;采用二代测序技术,检测SCAP和非SCAP中miRNAs的表达谱,并筛选差异表达(相差倍数>1.5)的miRNAs,用生物信息学方法对差异表达的miRNAs进行靶基因功能分析.结果:与非SCAP相比,SCAP中表达下调的miRNAs有has-miR-4532、has-miR-6131、has-miR-4284、has-miR-3182、has-miR-1273e、has-miR-7-1-3p、has-miR-31-3p、has-miR-3654、has-miR-495-3p、has-miR-382-3p,表达上调的miRNAs有has-miR-4508、has-miR-1247-5p、has-miR-6819-3p、has-miR-2116-3p、has-miR-490-5p、has-miR-335-5p、has-miR-1914-5p、has-miR-1249、has-miR-3180-3p、has-miR-668-3p.表达下调miRNAs所调控的下游靶基因主要有20个,表达上调的有6个,这些靶基因主要参与了细胞的自我更新、分化和迁移等生命过程.结论:SCAP特异性表达的miRNAs主要调控的下游靶基因及其基因功能可能与干性维持密切相关.
-
关于根尖牙乳头干细胞统一英文缩写的建议
根尖牙乳头干细胞是从尚未发育完成的牙根尖乳头组织中分离出的,具备间充质干细胞特性的一类牙源性干细胞. 2006年由施松涛团队首次报道并命名[1] ,其英文全称是Stem Cells From Apical Papilla,研究团队同时定义了该名称的缩写:SCAP. 2006年以后,国内针对SCAP的研究逐渐增加,但各研究团队发布研究成果时,尽管细胞来源一致,英文全称一致,但是对英文全称的缩写并不一致. 较多研究者均认同并使用"Stem Cells From Apical Papilla"这个英文定义及全称,但在对该名称的英文缩写却是"SCAPs";有的研究者引用了施松涛团队的文章,但是英文缩写却是"SCAPs". 此类情况导致各种专业杂志,甚至研究生论文中,关于SCAP和SCAPs的写法混杂,容易产生文献认知歧义.
