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1α,25-羟基维生素D3对人牙周膜细胞Ⅰ型白介素1受体表达的影响
目的 比较1α,25-羟基维生素D3(1α,25-dihydroxyvitamin D3,VD3)对幼稚和衰老的牙周膜细胞Ⅰ型白介素1受体(interleukin 1 receptor,type Ⅰ,IL-1R Ⅰ)mRNA表达的影响,以探讨增龄因素影响牙槽骨改建的可能机制.方法 小鼠骨髓细胞和成骨细胞共存培养,检测VD3刺激下破骨细胞的生成；半定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测小鼠成骨细胞和骨髓细胞、第3～5代和第17～20代人牙周膜细胞在VD3刺激下IL-1R Ⅰ mRNA的表达.结果 VD3能刺激小鼠骨髓细胞和成骨细胞共存培养系形成不规则形态的多核巨细胞,抗酒石酸酸性磷酸酶活性染色阳性；受VD3刺激共存培养系中成骨细胞表达IL-1R Ⅰ mRNA.VD3能刺激幼稚人牙周膜细胞表达IL-1R Ⅰ mRNA,其与甘油醛-3-磷酸脱氢酶的表达比为41％,而VD3刺激下衰老的人牙周膜细胞依旧不表达IL-1R Ⅰ.结论 衰老的牙周膜细胞在骨代谢调节因子VD3刺激下仍不表达IL-1R Ⅰ,推测是成年牙周组织改建迟缓的可能机制.
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白细胞介素1受体拮抗蛋白间接体内转基因抑制骨关节炎软骨破坏
目的通过白细胞介素1受体拮抗蛋白(IL-1Ra)间接体内转基因治疗实验性兔骨关节炎,探讨IL-1Ra对关节软骨病理改变及软骨基质降解的抑制作用.方法将30只新西兰大白兔随机分成3组,每组10只.对3组兔的左膝关节行部分滑膜切除,从中分离并培养滑膜成纤维细胞;3组兔的右膝关节行前交叉韧带横断术(ACLT)建立骨关节炎模型.把自体滑膜细胞回输第1组兔右膝关节腔内;把转染标记基因的自体滑膜细胞回输到第2组兔右膝关节腔内;把转染IL-1Ra基因的自体滑膜细胞回输到第3组兔右膝关节腔内.在各组滑膜细胞回输后的第2、4周,用ELISA方法分别检测关节液中IL-1Ra水平,用二甲基亚甲蓝法测定关节液及软骨中硫酸葡糖氨基聚糖(GAG)水平,各组软骨行组织染色、病理分级.结果在基因转入关节腔后,第3组兔右膝关节液中IL-1Ra水平在第2周时为(20.6±1.8) ng/ml,第4周时为(4.8±0.5) ng/ml;而第1、2组 IL-1Ra水平2、4周时均较低.第3组关节软骨降解明显被抑制,关节液中GAG含量为40.1 μg/ml,抑制率为56.2%,第2组关节液中GAG含量为84.5 μg/ml.然而第3组软骨中GAG含量比第2组高2倍,分别为30.2 μg/mg和10.8 μg/mg.第3组骨关节炎病理改变明显受到抑制.结论关节腔内注入体外转染IL-1Ra基因的自体滑膜细胞,能使关节腔局部IL-1Ra水平明显升高,使关节软骨病理改变及软骨基质降解受到抑制.
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小儿风湿热与白介素1受体拮抗剂基因多态性分析
用聚合酶链反应(PCR)技术对28例小儿风湿热患者和25例正常对照组白介素1受体拮抗剂(IL-lra)基因数目可变的串联重复多态性进行了分析.发现小儿风湿热患者中ILlRN*2等位基因频率明显高于正常对照组(P<0.05).如将28例患者分为两组,第一组为符合Jones诊断标准中任何2个主要表现或1个主要表现加2个次要表现者,第二组为临床表现多于第一组一个或几个者.则发现前者IL1RN*2频率与正常对照相比无显著差异(P>0.05),而后者有显著差异(P<0.05);提示IL1RN*2可能不直接影响小儿风湿热的易感性,但携带IL1RN*2者患病后可能病情更严重.
