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噬菌体蛋白Ⅷ文献资料
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抗体分子在噬菌体表面蛋白Ⅷ上的展示
目的观察抗体分子通过丝状噬菌体主要外壳蛋白Ⅷ和次要外壳蛋白Ⅲ在噬菌体表面呈现效果的差异.方法分别构建通过次要外壳蛋白Ⅲ或主要外壳蛋白Ⅷ展示抗乙肝表面抗原Fab、ScFv和角蛋白Fab的表达载体,制备噬菌体抗体,比较其抗原结合活性和Fab呈现水平,用多种方法尝试提高主要外壳蛋白Ⅷ介导的噬菌体展示效果.结果主要外壳蛋白Ⅷ对不同特异性抗体Fab段和不同形式的小分子抗体(Fab和ScFv)的展示效果均低于次要外壳蛋白Ⅲ的展示,增加主要外壳蛋白Ⅷ-Fab对野生型和主要外壳蛋白Ⅷ的表达比例、试用不同菌株、在Fab和主要外壳蛋白Ⅷ之间插入间隔序列、换用控制更为严密的启动子等措施,均未能改善主要外壳蛋白Ⅷ介导的噬菌体展示.结论以前所报道的通过主要外壳蛋白Ⅷ多价展示Fab段不是普遍存在的现象,对有些抗体基因不能达到多价展示.
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用蛋白Ⅷ在噬菌体表面展示抗体分子效果的观察
目的观察抗体分子通过丝状噬菌体主要外壳蛋白Ⅷ(cpⅧ)和次要外壳蛋白Ⅲ(cpⅢ)在噬菌体表面呈现效果的差异.方法分别构建通过cpⅢ或cpⅧ展示抗乙肝表面抗原(HBs)Fab、ScFv和抗角蛋白(Ker)Fab的表达载体,制备噬菌体抗体,比较其抗原结合活性和Fab呈现水平.用多种方法尝试提高cpⅧ介导的噬菌体展示效果.结果 cpⅧ对不同特异性抗体Fab段和不同形式的小分子抗体(Fab和ScFv)的展示效果均低于cpⅢ的展示,增加cpⅧ-Fab对野生型cpⅧ的表达比例、试用不同菌株、在Fab和cpⅧ之间插入间隔序列及换用控制更为严密的启动子等措施,均未能改善cpⅧ介导的噬菌体展示.结论以前所报道的通过cpⅧ多价展示Fab段不是普遍存在的现象,对有些抗体基因不能达到多价展示.
