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抗体分子在噬菌体表面蛋白Ⅷ上的展示
目的观察抗体分子通过丝状噬菌体主要外壳蛋白Ⅷ和次要外壳蛋白Ⅲ在噬菌体表面呈现效果的差异.方法分别构建通过次要外壳蛋白Ⅲ或主要外壳蛋白Ⅷ展示抗乙肝表面抗原Fab、ScFv和角蛋白Fab的表达载体,制备噬菌体抗体,比较其抗原结合活性和Fab呈现水平,用多种方法尝试提高主要外壳蛋白Ⅷ介导的噬菌体展示效果.结果主要外壳蛋白Ⅷ对不同特异性抗体Fab段和不同形式的小分子抗体(Fab和ScFv)的展示效果均低于次要外壳蛋白Ⅲ的展示,增加主要外壳蛋白Ⅷ-Fab对野生型和主要外壳蛋白Ⅷ的表达比例、试用不同菌株、在Fab和主要外壳蛋白Ⅷ之间插入间隔序列、换用控制更为严密的启动子等措施,均未能改善主要外壳蛋白Ⅷ介导的噬菌体展示.结论以前所报道的通过主要外壳蛋白Ⅷ多价展示Fab段不是普遍存在的现象,对有些抗体基因不能达到多价展示.
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广州市不同地区10岁以下儿童乙型肝炎疫苗免疫效果评价
目的 评价广州市不同地区10岁以下儿童乙型肝炎疫苗免疫效果.方法 对本市老城区、新城区和农村1995～2005年出生、接受乙型肝炎疫苗全程免疫的儿童,按分层随机抽样3 890人,检测其HBsAg和抗-HBs水平,并计算阳性率.结果 1995～2005年,三地区出生的儿童HBsAs阳性率逐年下降,抗-HBs阳性率逐年上升;老城区HBsAg阳性率比新城区和农村明显下降,老城区和新城区抗-HBs阳性率比农村明显上升;三地区10、5、0岁儿童HBsAg阳性率依次下降,抗-HBs阳性率依次上升.结论 广州市10岁以下儿童乙肝疫苗免疫保持在高水平,农村的乙肝疫苗免疫效果较老城区和新城区偏低,可能是造成乙型肝炎发病率高的主要原因之一.
关键词： 乙型肝炎疫苗 免疫效果 乙型肝炎病毒表面抗原 抗乙型肝炎表面抗体 -
抗-HBs国际单位RIA一点法定量测定与计算方法的探讨
在Radio-immuno Assay(RIA)试验测定抗-HBs国际单位的简易定量与计算中,采用RIA一点法测定,以分析表达式mIU/ml=SC(mIU/ml)[exp(0.69315S-NC/SC-NC)-1]进行结果计算.此式可以常用对数式表示为mIU/ml=SC(mIU/ml)[lg-1(0.30103S-NC/SC-NC)-1],当(S-NC)/(SC-NC)在0.3～1.1界线内时,其计算结果的相对误差小于6%,是目前误差小的简易计算方法.同时还推算求出Holliger公式的阳性对照的适含量为124.26mIU/ml,Richardson公式的阳性对照为125 mIU/ml,中国药品生物制品检定所公式的阳性对照为92.5 mIU/ml.
