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  • 胶体金免疫层析试验在检测急诊患者血液传播疾病中的应用

    作者:潘瑞钰

    目的 探讨胶体金免疫层析试验检测法(gold immunochromatography assay,GICA)在检测急诊病人乙型肝炎病毒表面抗原、丙型肝炎病毒抗体、人类免疫缺陷病毒抗体中的临床应用价值.方法 随机选择2010年2月至2013年2月在四川省双流县第一人民医院就诊患者1080人作为研究对象,采集患者血清标本进行GICA与酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA).以ELISA法检测结果为金标准,计算GICA检测乙型肝炎病毒表面抗原、丙型肝炎病毒抗体、人类免疫缺陷病毒抗体的灵敏度、特异度、漏诊率和准确性.结果 用GICA检测乙型肝炎病毒表面抗原的灵敏度为91.3% (21/23),特异度为99.6%(1053/1057),漏诊率为8.7% (2/23),准确性为99.4%(1074/1080);应用GICA检测抗丙型肝炎病毒抗体的灵敏度为57.1%(4/7),特异度为99.8%(1071/1073),漏诊率为42.9%(3/7),准确性为99.5%(1075/1080).应用GICA检测人类免疫缺陷病毒抗体的灵敏度、特异度和准确性为100.0%.结论 GICA可用于乙型肝炎病毒表面抗原和人类免疫缺陷病毒抗体的筛检,但对丙型肝炎病毒抗体的检测漏诊率高,不适宜用于丙型肝炎病毒抗体的筛检.

  • 浙江省杭州市595例无主患者4种感染性血清标志物检测结果分析

    作者:钟春燕;陈宝炳;陈君;陈松

    目的 了解浙江省杭州市无主患者乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、梅毒螺旋体(TP)及人类免疫缺陷病毒(HIV)的感染状况.方法 对2015年1-12月杭州市第三人民医院收治的595例无主患者,进行血清HBV表面抗原(HBsAg)、HCV抗体(抗-HCV)、TP抗体(抗-TP)检测以及HIV抗体(抗-HIV)筛查及确认试验,并对结果进行统计分析.结果 595例无主患者中,HBsAg阳性63例(10.59%),抗-HCV阳性19例(3.19%),抗-TP阳性29例(4.87%),抗-HIV阳性4例(0.67%),均高于普通住院患者,其中抗-HCV及抗-TP阳性率差异有统计学意义(x2=5.765,P=0.016;x2=14.053,P=0.001).不同性别及年龄段无主患者4种血清标志物的阳性率差异均无统计学意义(P>0.05).结论 对无主患者进行HBsAg、抗-HCV、抗-TP及抗-HIV检测对减少医疗纠纷及加强医护人员自我保护意识、降低职业暴露风险具有重要意义.

  • Pre-S1抗原在临床及健康体检中的应用价值

    作者:徐俊;郭楠

    目的 探讨Pre-S1抗原检测的临床意义.方法 采用ELISA方法检测乙肝病毒"两对半"及Pre-S1抗原,HBV-DNA检测运用荧光定量PCR方法.结果 在HBsAg阳性的标本中,HBV-DNA检出率为69.3%,而Pre-S1检出率为65.8%;97例Pre-S1阳性而HBeAg阴性的标本,占Pre-S1总阳性病例的27.8%,在HBeAg阴性的病例中HBV-DNA阳性为97例,占HBV DNA总阳性病例的25.5%.在HBsAg阴性组的标本402例中,检出Pre-S1阳性9例.结论 Pre-S1抗原与HBV-DNA高度相关;PreS1可替代或补充HBe系统及HBV-DNA的检测,建议纳入从业人员健康体检和献血员筛查的检测项目.

  • 乙型肝炎病毒表面抗原和抗体同时阳性模式分析

    作者:黎燕琼

    目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染者乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)与乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)同时阳性的模式,以及与前S1抗原(PreS1Ag)的关系,分析其产生的原因和临床意义.方法 采用化学发光法检测HBsAg和HBsAb及其它三项HBV血清标志物(HBeAg、HBeAb、HBcAb),同时采用ELISA法检测样本的PreS1Ag.结果 HBsAg和HBsAb同时阳性的33例患者中出现3种HBV模式,33例HBsAg和HBsAb同时阳性样本中,有24例PreS1Ag结果阳性,阳性率72.73%.结论 HBV感染患者出现HBsAg和HBsAb同时阳性,原因复杂,并不代表疾病真正好转,而且,PreS1Ag阳性率达72.73%,PreS1Ag阳性预示病毒复制活跃,传染性强,应引起重视.

  • 乙型肝炎病毒DNA的含量与乙型肝炎病毒表面抗原的关系

    作者:温涛;方建华;刘玉振;李伍升

    目前,临床上常用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物,一些实验室利用乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)ELISA法检测吸光度或S/CO值(S为样品的吸光度值,CO为Cut Off值)高低来观察药物的治疗效果,我们采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)的方法检测HBV DNA的含量[1],并与血清标志物HBsAg的S/CO值高低进行比较,以探讨二者之间的关系.

  • 牛源乳铁蛋白体外抗HBsAg分泌的研究

    作者:李松涛;黄桂荣;周海波;刘宁

    目的 探讨牛源乳铁蛋白(BLF)体外抑制HbsAg分泌作用.方法 以天然HBV感染HepG2细胞为模型,应用ELISA法测定细胞上清中的HBsAg水平,并用MTT法对BLF对HepG2细胞的毒性进行研究.结果 BLF对细胞的大无毒荆量(TD0)为3.Og/L,半数中毒剂量(TD50)为11.08g/L;先用HBV对HepG2细胞进行感染,再加入BLF,各浓度组BLF均对HBsAg分泌有一定抑制作用,BLF浓度3.0g/L时对HBsAg的抑制率达58.34%;将BLF与HBV阳性血清作用后再接种于细胞,各实验组均不能抑制HBsAg分泌,将BLF先与细胞作用后洗去BLF,在接种病毒后,BLF浓度0.5g/L以上各组均能显著抑制HBsAg分泌,但BLF0.1g/L组不能抑制HBsAg分泌.乳铁蛋白水解物不能抑制HBsAg分泌.结论 牛源乳铁蛋白不能通过与HBV结合来阻断对HepG2细胞的感染,但可以通过对HepG2细胞的保护来阻断感染;当HepG2细胞感染HBV后,牛源乳铁蛋白仍可抑制HBsAg分泌,将乳铁蛋白水解后无抑制作用,说明是乳铁蛋特有结构起作用.

  • 免疫层析法检测乙肝病毒表面抗原和表面抗体结果分析

    作者:张宁静;钟继荣;雷红霞;刘建锋;付鸿;甄晓荣;王军;张平

    目的:探讨免疫层析法与酶联免疫法(ELISA)检测乙型肝炎病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)和表面抗体(抗-HBs)符合率.方法:分别用免疫层析法和酶联免疫法检测待检儿童血清HBsAg和抗-HBs,将两法检测结果做以分析、比较.结果:400例标本中,胶体金法和ELISA法检测HBsAg结果差异无统计学意义,两法符合率为97.25%;乳胶层析法和ELISA法检测抗-HBs 结果差异有统计学意义,两法符合率为79.25%.结论:免疫层析法简便快速,但存在一定假阳性或假阴性率,不能完全替代ELISA法进行乙肝病毒血清标志物的检测,适合在不具备ELISA法检测条件的基层医疗单位和标本初筛使用.

  • ELISA 方法检测乙型肝炎病毒表面抗原影响因素分析

    作者:王秀和;林凌;陈付榆

    目前乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)检测常用的方法是酶联免疫吸附试验(ELISA),它是一种既特异又敏感的免疫测定法,具有方便、快速,无需大型仪器和无核污染等优点,被广泛使用.准确地检测HBsAg对于HBV感染的临床诊断、治疗以及避免医患纠纷的发生有着重要的意义.笔者结合多年临床ELISA检测HBsAg的工作实践,将实验过程中的影响因素分析报道如下.

  • 乙型肝炎病毒表面抗原携带者配偶感染乙型肝炎危险性研究

    作者:孙爱武;毕胜利;王锋;王富珍;张爽;涂秋风;邵晓萍;郑徽;孙校金

    目的 探讨乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)表面抗原(HBsAg)携带者配偶感染HBV危险性,为制定乙肝相关防控策略提供参考依据.方法 选择广东和江西省2006年全国乙肝血清流行病学调查发现的20 ~ 45岁HBsAg携带者及配偶作为病例组,运用病例对照方法按居住地、性别、年龄及婚龄等因素配比选择HBsAg阴性者及配偶为对照组,开展问卷调查和乙肝血清学指标检测.利用PCR方法分析夫妻双方均HBsAg阳性的HBV基因型.结果 HBsAg携带者配偶HBsAg携带率为13.21%,明显高于对照组配偶(6.29%),差异有统计学意义(x2=4.23,P<0.05);HBsAg携带者其配偶的携带率均高于HBsAg阴性者的配偶;HBsAg携带者配偶的HBsAg携带率与结婚年限、性生活频率呈正相关,并与安全性行为关系密切.21对HBsAg均阳性的夫妻中,13对PCR扩增HBV阳性,其中11对(84.62%)HBV基因型相同(8对HBV为B型,3对为C型),仅2对夫妻HBV基因型不同.结论 HBsAg携带者配偶感染HBV风险高;提倡HBsAg携带者主动告知配偶,采取安全性行为或配偶及时接种乙肝疫苗等有效措施.

  • 江苏省海门市原发性肝癌队列随访结果分析

    作者:黄培新;王娜;钱俊华;江峰;杨艳蕾;林文尧;赵琦;赵根明;姜庆五

    目的 分析海门原发性肝癌队列(海门队列)中死亡情况及其危险因素.方法 海门队列自1992年建立,共纳入25 ~ 69岁健康人群89 789人.对入组研究对象进行基线调查并采集外周静脉血10 ml,检测HBsAg,并对生存状况及肝癌死亡情况每年进行1次随访.计算肝癌死亡率,采用Cox比例风险模型进行多因素分析.结果 截至2014年12月31日,海门队列共随访1 299 611人年,其中2 583(男性2 149,女性434)例死于肝癌.肝癌死亡病例中HBsAg阳性者占73.87%.男女性肝癌死亡率分别为247.80/10万人年和100.38/10万人年.多因素分析显示,HBsAg阳性是海门队列男女性原发性肝癌为主要的危险因素(男性:HR=15.97,95%CI:14.29 ~ 17.85;女性:HR=21.63,95%CI:16.16~28.96).年龄、吸烟史、既往肝炎史以及肝癌家族史均与原发性肝癌发病风险有关.结论 海门地区成年人原发性肝癌死亡率处于较高水平,HBV感染仍为该地区主要的危险因素.

  • 中国1~4岁儿童首针乙型肝炎疫苗未及时接种者特征及影响因素分析

    作者:王富珍;张国民;沈立萍;刘建华;郑徽;王锋;缪宁;孙校金;梁晓峰

    目的 分析中国1~4岁儿童乙型肝炎疫苗首针HepB(HepB1)未及时接种的流行病学特征和影响因素.方法 2014年在全国31个省份160个国家级疾病监测点,采用分层二阶段整群随机抽样方法,通过问卷调查1~4岁儿童的出生日期、性别、民族、出生地点、HepB接种史等,并采集静脉血3 ml进行HBsAg检测.运用SAS9.4统计软件分析HepB免疫儿童中HepB1未及时接种者的年龄、性别、民族、城乡、地区分布及影响因素,以及HepB1不同接种时间与HBsAg流行率的关系.结果 共分析1~4岁儿童12 587人,HepB1未及时接种率为10.12%,出生地点、民族、城乡、居住地区、年龄是影响儿童HepB1未及时接种的主要因素.HepB1未及时接种率3~4岁儿童(11.13%)高于1~2岁儿童(8.97%);农村(12.05%)高于城市(8.19%);西部地区(13.41%)高于中部地区(9.27%),中部地区又高于东部地区(7.72%);少数民族(18.06%)高于汉族(8.77%);在医院外出生者(57.66%)高于在医院内出生者(9.27%).调查1~4岁儿童HBsAg流行率为0.31%.HepB1及时接种儿童HBsAg流行率(0.25%)低于HepB1未及时接种儿童(0.89%).结论 中国1~4岁儿童HepB免疫儿童HBsAg流行率降至0.5%以下,HepB1及时接种率达到90%.西部地区、农村、少数民族、在医院外分娩的婴儿是现阶段HepB接种的重点关注对象.

  • 表达乙型肝炎病毒表面抗原的非复制型重组痘苗病毒疫苗株RVJ123ΔCK的构建及其生物学性状鉴定

    作者:陆柔剑;郭斐;娄元梅;孙朝晖;阮力

    利用重组质粒pNeo-CK与pNeo-CKLacZ和表达乙型肝炎(乙肝)病毒S抗原的重组痘苗病毒RVJ123[1],构建了非复制型重组痘苗病毒RVJ123ΔCK.Southern blot证实,非复制型重组病毒RVJ123ΔCK基因组C和K片段间与宿主范围和毒力相关的基因稳定缺失,同时,J片段中插入的乙肝S抗原基因稳定存在.重组病毒RVJ123ΔCK在鸡胚成纤维母细胞中可良好繁殖,而在人源细胞系中不繁殖或仅低度繁殖,但都能表达HBsAg,并且在病毒一个复制周期内,复制型和非复制型病毒HBsAg表达水平无明显差别.

  • 乙型肝炎病毒表面抗原定量检测临床意义的探讨

    作者:张继东

    为探讨乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)定量检测作为反映乙型肝炎病毒(HBV)复制情况的临床意义,本文对200例HBsAg阳性标本分别做HBsAg定量检测和HBV-DNA检测,血清学标志物检测,并对10例患者进行随访检测以上项目.根据测得的HBsAg含量将200例标本分为五组,计算出各组HBV-DNA阳性率,发现随HBsAg含量增高,HBV-DNA阳性率也显著增高(P<0.01).根据HBVe系统不同模式分组显示,随HBV感染好转,HBsAg含量也随之降低(P<0.05).对6例HBV-DNA转阴患者HBV-DNA转阴前后的HBsAg含量比较,发现随HBV-DNA转阴,HBsAg量也显著降低(P<0.01).综合以上结果,可以说明血清中HBsAg含量,可以间接反映体内HBV的情况,HBsAg定量检测可作为间接反映体内HBV复制活跃程度的一个指标,对临床药物疗效评价具有重要意义.

  • 酶联免疫吸附实验中全自动立式洗板法应用效果评价

    作者:何露;刘丽;孔凡虹;曹敬丽;贾子琪;刘文松;许震;王雅杰

    目的 与传统手工洗板法、水平注液式洗板法相比较,评价酶联免疫吸附实验中全自动立式洗板法的应用效果.方法 评价全自动立式洗板法洗板机的性能,包括微孔中液体残留量测定、针头堵孔可能性检测、交叉污染可能性检测.收集乙型肝炎病毒表面抗原化学发光法定量检测结果分别为阴性、弱阳性、阳性、强阳性的四组样本各30例,使用酶联免疫吸附实验原理乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒检测,其中洗板步骤分别使用手工洗板法、水平注液式洗板法、全自动立式洗板法三种方法,由酶标仪读取结果,记录洗板时间,数据利用r检验进行统计学分析.结果 本研究中全自动立式洗板法酶标板微孔中液体残留量均值为0.0087±0.0002μL,<0.01μL;全自动立式洗板机使用6个月(每周至少使用2次),96个针头未出现堵孔现象,洗板机6个月前后的直线水柱长度分别为6.53±0.27cm、6.58 ±0.31cm,两组数据差异无统计学意义;阳性质控品和阴性质控品交叉检测,及阳性混合血清和阴性混合血清交叉检测未出现交叉污染现象.120例临床样本利用三种洗板法的定性检测结果一致,其中30例弱阳性样本,均有1例假阴性且来源于同一样本;三种洗板法检测阴性、弱阳性、阳性、强阳性样本的测定结果差异无统计学意义(P>0.05).手工洗板法、水平注液式洗板法、全自动立式洗板法的洗板时间分别为8min、5min、20s.结论 全自动立式洗板法可满足酶联免疫吸附实验临床检测中洗板要求.

  • 新型铕络合物用于HBsAg的时间分辨荧光免疫检测

    作者:朱艳冰;李庆阁;王桂兰;袁景利

    利用稳定的新型铕荧光络合物BHHCT与Eu3+标记羊抗人HBsAb和Eu3+标记BSA-SA,建立定量测定血清HBsAb的Eu3+-BHHCT-HBsAb-TRFIA法和Eu3+-BHHCT-BSA-SA-TRFIA法.结果表明,这两种方法低检出值分别为0.2ng/mL和0.05ng/mL,标准曲线范围均为0-100ng/mL,批内变异系数CV均小于10%,后者回收率为85%-115%.用Eu3+-BHHCT-BSA-SA-TRFIA法与ELISA法同时检测118份血清样品,结果表明前者的检出率比后者高.

  • 化学发光免疫分析法检测HBcAb阳性、HBsAg阴性血清中隐匿性乙型肝炎病毒感染的分析

    作者:何成山;马晨芸;陆志成

    目的 分析化学发光免疫分析法(CIA)检测乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)阳性、乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阴性血清学模式中隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)的情况,旨在了解CIA检测HBsAg的分析性能,并为评价OBI提供实验室依据.方法 收集2017年5月至2017年12月本院检验科近20000份CIA检测乙型肝炎病毒(HBV)五项血清学标志物中HBsAg无反应性、HBcAb阳性且信号值比临界信号值(S/Co值)>7.5的样本1157例,对样本HBcAb再进行酶联免疫吸附试验(ELISA)复筛,选取A450nm吸光值<0.070样本294例进行HBV DNA检测.结果 1157例样本进行HBcAb ELISA检测,复筛得HBcAb阳性标本1053例,阴性104例,其中A450nm吸光值<0.070样本294例.294例样本进行HBV DNA检测,其中HBV DNA阳性(HBV DNA> 20IU/mL为阳性)34例,总阳性率为2.94%(34/1157).22例HBV DNA载量21 ~ 99IU/mL;7例为100~1000IU/mL;5例为>1000IU/mL;主要以低水平形式存在.以HBeAb、HBcAb阳性及HBsAb、HBeAb和HBcAb阳性这两种血清学模式中HBV DNA检出率较高;HBcAb S/Co≥10.0样本HBV DNA阳性率可达13.5%.结论 CIA作为检测HBsAg灵敏度较高的方法,依然存在HBsAg阴性而HBV DNA阳性的OBI.这对于输血的安全性和乙肝的预防监测及治疗都存在重大影响.临床上对于HBsAg阴性伴高反应性HBcAb(S/Co值≥10.0)的患者应进行一步行HBV DNA检测,以明确OBI的存在.

  • 乙型肝炎病毒表面抗原定量检测及临床意义分析

    作者:陆燕;陈桂兰;韦庆成;覃庆开

    乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)定量检测是临床治疗乙型肝炎的一个非常重要的指标,它不仅能区分乙型肝炎病程的各种分期,而且对药物治疗效果及预后有良好的预测作用.本文从乙型肝炎病毒表面抗原的结构、定量检测的方法学以及在临床中的应用等方面做一综述分析.

  • 四川省≤3岁儿童乙型肝炎疫苗接种率及乙型肝炎病毒表面抗原携带率调查

    作者:刘青恋;杨超美;方刚;周新;何惠;曾义学;罗湘蜀;李健

    为了解四川省≤3岁儿童乙型肝炎(乙肝)疫苗接种率及乙肝病毒表面抗原(HBsAg)携带率,采用组群抽样法,全省分成三层,城市一层,农村按经济状况分为一般农村和贫困农村,于2002年5~7月对3 558名适龄儿童进行了调查.结果显示:1~3岁儿童乙肝疫苗接种率、首针及时接种率、全程接种率和全程及时接种率分别为79.93%、55.11%、66.13%、50.12%;城市儿童的四项接种率均非常明显地高于农村儿童(χ2=266.870、371.268、71.170、302.387,P均<0.01).<1岁儿童乙肝疫苗接种率为86.49%.城市<1岁儿童首针及时接种率为79.02%,非常明显地高于农村儿童(χ2=40.498,P<0.01).住院和在家分娩儿童的首针及时接种率分别为66.67%和22.01%,差异有非常显著的统计学意义(χ2=477.096,P<0.001).该人群HBsAg携带率为3.06%,较1992年同年龄组人群HBsAg携带率下降了60.21%;城市儿童HBsAg携带率明显低于贫困农村儿童(χ2=8.095,P<0.05);有接种史的儿童其HBsAg携带率非常明显地低于无接种史的儿童(χ2=31.997,P<0.001).因此,乙肝疫苗纳入计划免疫后,提高农村,特别是贫困农村新生儿乙肝疫苗接种率和首针及时接种率,是今后工作的重点.

  • 珠江三角洲地区1~6岁儿童乙型肝炎病毒表面抗原和抗体现状调查分析

    作者:雷仁宇;罗耀星;谢莘;李晖;邵晓萍;林永杰;李建基;吴承刚;疏俊

    目的为评价珠江三角洲地区1~6岁儿童乙型肝炎(乙肝)疫苗的免疫效果.方法于2004年7~8月在广州、深圳、东莞、佛山市,采用典型整群抽样方法,随机抽取1997年7月1日~2003年6月30日出生的1173名儿童,调查乙肝病毒表面抗原(HBsAg)和乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)阳性率现状.结果 HBsAg阳性率1.11%,本地户籍与外地户籍儿童的HBsAg阳性率、不同年龄组儿童HBsAg阳性率,其差异均无显著的统计学意义(x2=2.00,P=0.157;x2=2.55,P=0.768).抗-HBs阳性率65.81%,本地户籍儿童(69.83%)高于外地户籍儿童(61.75%,x2=8.50,P=0.004);不同年龄组儿童抗-HBs阳性率的差异无显著的统计学意义(x2=6.94,P=0.225).结论珠江三角洲地区1~6岁儿童HBsAg阳性率达到较低水平.

  • 武汉市近10年1~3岁儿童乙型肝炎疫苗接种率和乙型肝炎病毒表面抗原携带率调查及发病率分析

    作者:余滨;王夏;韩荣华;陈载超;陈再芳

    目的了解武汉市近10年1~3岁儿童乙型肝炎(乙肝)疫苗接种率、乙肝病毒表面抗原(HBsAg)携带率及孕产妇乙肝病毒(HBV)感染等情况.方法采用分层多阶段随机抽样法将全市分为两层(城区和郊区),分别于1992、1994、1999、2003年分4次对适龄儿童进行了调查,共调查2 243名儿童.结果随着郊区乙肝疫苗接种工作的加强和深入,城郊差距逐渐缩小.儿童HBsAg携带率从1992年的9.09%下降到2003年的1.29%,下降了85.81%;乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)阳性率从1992年的42.42%上升到2003年的83.19%.2003年调查显示:HBsAg携带率、抗-HBs阳性率城郊差异无显著的统计学意义(χ2=0.1624、1.5417,P均>0.05).结论 2002年乙肝疫苗纳入儿童计划免疫后,加强全市的乙肝疫苗接种工作,迅速扭转工作滑坡的局面,是今后工作的重点.

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