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离子交换-分子筛文献资料
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重组人抗HBsAg Fab抗体的纯化方法比较研究
目的研究重组人抗HBsAg Fab抗体的纯化条件.方法采用羊抗人Fab抗体亲和层析柱、14F7单克隆抗体亲和层析柱、离子交换-分子筛层析柱,分别纯化由酵母工程菌(GS115/Fab)发酵的重组人抗HBsAg Fab抗体,并对3种纯化方法所得Fab抗体的纯度、收率、与HBsAg的结合活性进行比较.结果 3种纯化方法中,14F7单克隆抗体柱纯化的Fab抗体的纯度达98%左右,Fab抗体柱纯化的Fab抗体的纯度为95%,但这两种亲和柱的目的蛋白收率都不高,分别为35%、55%.而离子交换柱纯化的Fab抗体的纯度为93.8%,经分子筛柱进一步纯化后,可达98%以上,Fab抗体蛋白收率可达80%以上.经ELISA分析,3种方法纯化的Fab抗体均具有较高的HBsAg抗原结合力和特异性.结论通过对3种纯化方法的比较得出,离子交换-分子筛层析法是重组人抗HBsAg Fab抗体的佳纯化方法,这为抗HBsAg Fab抗体的产业化生产和临床研究打下良好基础.
关键词： 抗HBsAg Fab抗体 亲和层析 离子交换-分子筛 纯化
