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生物工程抗体文献资料
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加强免疫扩散法鉴定生物工程抗体
鉴于鼠源性单克隆抗体在临床应用中的明显缺陷[1],应用生物工程技术制备人源性抗体或人源化抗体成为近年来的研究热点.生物工程抗体有多种结构形式,其中小分子抗体如Fv,ScFv,Fab 等是常用的形式.由于该类小分子抗体是单克隆性质的抗体片段,不能与相应的抗原相互交联,所以不能用常规的免疫凝集、免疫沉淀、免疫浊度技术对其进行定性或定量测定[2].酶联免疫法可测定Fab的抗原结合活性,但需要纯化的特异抗原和酶标记抗Fab抗体,方法学亦需优化;免疫转印法具有直观、敏感的特点,但影响因素较多.本文旨在建立一项直观、敏感的单价抗体测定技术,并对其可行性、敏感度进行研究.
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生物工程人源抗-HBsFab的抗原特异亲合力简易测定
目的建立一种简易的抗体亲合力测定技术,对生物工程抗-HBsFab进行抗原特异亲合力测定.方法应用异种抗体竞争抑制法,在硝酸纤维素膜上进行不同抗原浓度、不同抗体抑制浓度的抗原、抗体反应.酶标记抗Fab抗体(Fabspecific)与相应底物显色,通过抑制效果估测靶抗体的亲合力.结果①抗-HBsFab组对不同浓度的抗原皆为阳性且能显示浓度差.②鼠腹水单克隆抗-HBs在10倍于人源抗-HBsFab范围内无抑制作用;多克隆羊抗-HBsAg在10倍于人源抗-HBsFab时显示抑制效应,而在同倍和1/10浓度时无抑制作用.结论本研究建立的是一种简易、实用的方法,能够达到直观、实际的抗体亲合力检测目的.
