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新型低基础表达Tet-on基因表达系统的构建与鉴定
目的:构建一种新型的具有更低基础表达的Tet-on调控系统,以用于毒性蛋白及+RNA病毒的真核细胞调控合成.方法:对目前常用的Tet-on系统中的四环素调控蛋白(rtTA、tTS)的表达途径进行改进,使得在非诱导条件下调控蛋白的基础诱导活性进一步降低.结果:相比原有的Tet-on系统,新构建的Tet-on系统非诱导状态下的基础表达值下降了一半以上.结论:成功构建基础表达值更低的Tet-on调控系统,为真核调控表达毒性蛋白或合成+RNA病毒打下了基础.
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正常生活状态下的大鼠脑中FOS的基础表达
用免疫组织化学ABC方法普查了正常生活状态下大鼠全脑内FOS的基础表达.结果显示在正常生活状态下大鼠脑中有广泛而恒定的FOS表达,出现于许多核团,如:孤束核的连合核、内侧亚核,脑桥核,臂旁外侧核及KF核,下丘,丘脑室旁核,下丘脑乳头体上核、视交叉上核以及中央杏仁核,新皮质等处.另外,在外侧网状核,三叉神经脊束核尾侧亚核,Al区,舌下神经前置核,小脑皮质颗粒层,中央灰质腹外侧部,腹侧被盖区,顶盖前区,下丘脑后区,外侧膝状体腹侧核,外侧缰核,尾壳核,屏状核,视上核,隔外侧核,扣带回皮质和嗅结节等处也有恒定的FOS表达.面部皮下注射甲醛后,在部分脑区如三叉神经脊束核尾侧亚核Ⅰ、Ⅱ层及下丘脑室旁核等处FOS表达增多,而脑内大部分核团FOS表达模式未变.本文作者推测,这些正常生活状态下的FOS表达可能与机体的基础代谢以及内脏、躯体功能活动,外界刺激如光线、声音等感觉传人活动有关.在分析实验刺激引起的FOS表达变化时应注意区分.