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  • 乳腺生长抑制因子mammastatin表位抗原的克隆表达及初步血清学测定

    作者:黄焰;宋晓国;张贺秋;王国华;王刚乐;官奇;尉承泽

    目的:获得重组乳腺生长抑制因子(mammastatin)表位抗原蛋白,制备抗血清,以测定正常人及乳腺癌患者血清中mammastatin存在水平.方法:用BioSun生物软件对 mammastatin氨基酸序列进行分析,确定表位序列,PCR逐步延伸法合成表位基因,构建pBVIL1-mammastatin和pBVIL6-mammastatin表达质粒,转化于大肠杆菌HB101中进行表达,经纯化后免疫大耳白兔,制备抗血清,用双抗体夹心法检测乳腺癌及正常人的血清.结果:重组 mammastatin抗原在大肠杆菌中获得了高效表达,并获得了兔多抗血清.用双抗体夹心法检测,显示95例正常对照血清mammastatin表达水平显著高于95例乳腺癌(平均D值,正常组0.261,乳腺癌组0.135,Wilcoxon秩和检验P=0.000<0.01,差异显著).结论:正常人血清中乳腺生长抑制因子mammastatin 存在水平显著高于乳腺癌患者.

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