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  • 志贺毒素B亚单位及其模拟表位的制备和免疫保护效应

    作者:包士中;史晶;蔡昆;侯晓军;高翔;刘吴;荫俊;王慧

    目的:对重组表达的StxB和预测的模拟表位肽进行免疫保护效应评价.方法:用分子生物学方法构建基因工程菌,IPTG诱导表达重组StxB,经复性后进行离子交换层析纯化.同时采用生物信息学手段对StxB的表位相关参数进行分析,预测StxB可能的抗原表位.以纯化的StxB和合成的模拟表位肤免疫小鼠后攻毒,评价StxB及其模拟表住肽的免疫保护效应.结果:表达并制备了90%以上纯度重组StxB;发现p14和p17多肽易形成转角和无规卷曲的柔性区段,可及性、极性和亲水性较强,是可能的抗原表位.免疫保护试验显示,经重组StxB和合成多肽免疫的小鼠发病延迟.症状减轻,存活率显著提高.结论:重组StxB和预测的模拟表住肽具有良好的免疫保护效果.为亚单位疫苗及其作用机制的研究奠定了基础.

  • Hca-F抗原-HSP70 BCG疫苗免疫对小鼠肝癌Hca-F的免疫保护效应

    作者:郭连英;张婷;黄琳;张雪;刘花丽;于向洋;王慧娟;高瑞芳;李发胜;曹靖

    目的 探讨化学交联法构建的Hca-F抗原-卡介苗热休克蛋白70(HSP70BCG)复合物对Hca-F肝癌的主动免疫保护效应及其机制.方法 采用ADP亲和层析方法提取HSP70BCG,超速离心法提取粗制肿瘤抗原,采用化学连接法或加入ADP构建Hca-F抗原-HSP70BCG复合物,免疫正常小鼠,3次后检测对Hca-F攻击的主动免疫保化效应,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测Hca-F刺激下的脾细胞增殖反应,用流式细胞仪检测脾细胞表型的变化.结果 化学交联法和加入ADP构建的Hca-F抗原-HSP70BCG复合物免疫可延长小鼠的存活时间,增强脾细胞对抗原刺激的应答能力和细胞介导的细胞毒活性、提高γδT细胞的百分率.结论 Hca-F抗原-HSP70BCG复合物免疫可诱导抗瘤免疫保护效应.

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