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增强DNA疫苗免疫效果策略研究进展
在近年发展的疫苗策略中,DNA疫苗由于具备独特的优势而成为研究的热点.然而,虽然DNA疫苗的效果已经在多种动物模型中得到了证实,但是在人体临床试验的结果却不尽如人意.近年来,研究人员发展了多种新的方法来提高DNA疫苗的免疫效果.本文就这一领域的进展进行综述,并对DNA疫苗的应用前景做一展望.
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提高CpG ODN免疫效价方法的研究进展
1995年Krieg等[1]研究发现CpG二寡聚核苷酸(ODN)是病原体DNA免疫刺激活性的基础结构并等将这类含有非甲基化CpG的特定结构称为CpG基序,也有学者称其为免疫刺激序列.其中,组成CpG ODN胞嘧啶的第五位碳原子必须是非甲基化的,正是因为这种结构,使CpG ODN具有免疫刺激活性作用,换言之,这也是CpG ODN免疫刺激活性的核心结构.具有这种结构的CpG ODN能被Toll样受体(TLR9)特异性识别,通过TLR9的识别作用启动信号转导级联反应.由CpGODN引起的免疫刺激活性作用是明显且多样化的,其主要作用包括:(1)直接刺激浆细胞样树突细胞(pDCs):通过促进pDCs成熟并使其分泌大量的IL-12、细胞共刺激分子CD86及少量的肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6.
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LE-pGJA-P/VAX黏膜递呈系统的制备及其理化性质评价
目的:制备LE- pGJA- P/VAX黏膜递呈系统,并对其理化和生物学性质进行检测.方法:利用中试生产的pGJA- P/VAX质粒通过与脂质体LE溶液直接混合制备LE- pGJA- P/VAX复合物,通过琼脂糖凝胶电泳阻滞实验和激光粒度仪检测该复合物的理化性质,并将其体外转染CHO细胞检测是否能体外表达目的蛋白.结果:制备的LE- pGJA- P/VAX复合物平均粒径为50 nm,ZETA电位为14.5 mV,体外转染CHO细胞48 h后,经细胞免疫荧光染色,转染组可见细胞浆红色荧光染色,提示可有效表达质粒编码的PAc蛋白,而裸质粒转染组则未见明显红色荧光.结论:LE- pGJA- P/VAX复合物表面电荷均匀,粒径小,且粒径分布范围窄,符合纳米粒子特征,可在体外表达编码蛋白,提示该递呈系统可用于防龋DNA疫苗的黏膜递呈,为后续增强防龋DNA疫苗经鼻腔黏膜途径投递的免疫效能奠定基础.
