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膜糖蛋白Ⅲa文献资料
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抗血小板膜糖蛋白SZ-21单链抗体的制备和生物学特性研究
目的将能与血小板膜糖蛋白Ⅲa特异结合的单克隆抗体SZ-21构建成单链抗体(SZ-21ScFv),为其临床应用奠定基础.方法构建SZ-21ScFv基因的质粒pET20b-21ScFv,在大肠杆菌E coli BL21(DE3)PlysS中表达了功能分子.表达产物经过包涵体的溶解、Ni-NTA树脂亲和吸附纯化和蛋白质的体外复性过程,获得具有生物活性的高纯度单链抗体片段.结果体外实验证实表达量占菌体蛋白的21%.SZ-21单链抗体能够抑制ADP诱导的血小板聚集,其抑制能力呈剂量依赖性,在浓度为20 μg/ml时达到大抑制率.流式细胞术检测证实该单链抗体能与内皮细胞反应,同时也可以抑制纤维蛋白原与血小板的结合.结论表达的单链抗体具有抑制血小板聚集和抑制纤维蛋白原与血小板结合的能力,有望用于血栓性疾病的治疗.
关键词： 血小板 膜糖蛋白Ⅲa 单链抗体(ScFv) 内皮细胞 血栓形成
