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活血生肌类中药对大鼠急性钝挫伤后骨骼肌Ⅱb型MHC及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响
目的:观察活血生肌类中药对骨骼肌钝挫伤后修复过程中Ⅱb型肌球蛋白重链(myosin heavy chain; MHC)及Ⅰ、Ⅲ型胶原(collagen-Ⅰ和collagen-Ⅲ)蛋白表达的影响.方法:将采用打击装置造成后下肢肌群钝挫伤的108只大鼠随机分为活血生肌类中药治疗组、IGF-Ⅰ治疗组及生理盐水对照组.用免疫组化方法分析骨骼肌钝挫伤后修复过程中肌肉Ⅱb型MHC、Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白的表达.结果:(1)急性钝挫伤后各组动物骨骼肌Ⅱb型MHC及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达量均显著降低(P<0.01),随修复过程呈上升趋势并维持在相对恒定的水平.(2)活血生肌类中药组大鼠在骨骼肌修复过程中Ⅱb型MHC 蛋白表达水平的升幅及峰值明显高于生理盐水组(P<0.01),但低于IGF-Ⅰ组(P<0.01).(3)3组大鼠Ⅰ型胶原蛋白表达水平均于损伤后第21天达到高峰,但活血生肌类中药组大鼠该蛋白表达峰值及相对恒定水平明显低于生理盐水组(P<0.01),与IGF-Ⅰ组比较无显著差异(P>0.05).(4)3组大鼠Ⅲ型胶原蛋白表达水平均于损伤后第14天达到峰值,下降至一定水平后基本维持在高于正常的水平.活血生肌类中药组大鼠Ⅲ型胶原蛋白表达的峰值水平及终相对恒定的水平明显低于生理盐水组(P<0.01),与IGF-Ⅰ组无显著差异(P>0.05). 结论:急性骨骼肌钝挫伤修复过程中,活血生肌类中药能有效地促进Ⅱb型MHC 蛋白表达,阻止Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达过度升高,从而有利于损伤组织修复.
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注射活血生肌类中药对大鼠骨骼肌急性钝挫伤后肌肉Ⅱb型MHC及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响
目的:观察活血生肌类中药对骨骼肌钝挫伤后修复过程中IIb型肌球蛋白重链(myosin heavy chain; MHC)及Ⅰ、Ⅲ型胶原(Collagen-Ⅰ和Collagen-Ⅲ)mRNA表达的影响.方法:采用打击装置造成126只大鼠后肢肌群钝挫伤,用半定量逆转录-聚合酶链式反应(semi-quantitative RT-PCR)分析mRNA的表达.结果:(1)急性钝挫伤后,各组大鼠骨骼肌IIb型MHC及Ⅰ、Ⅲ型胶原的mRNA表达量均显著增高(P＜0.01).(2)修复过程中,注射活血生肌类中药治疗组大鼠IIb型MHC mRNA表达水平的升幅显著高于生理盐水对照组(P＜ 0.01),但低于注射IGF-I治疗组(P＜ 0.05).(3)修复过程中,注射活血生肌类中药治疗组大鼠Ⅰ型与Ⅲ型胶原mRNA的表达水平显著低于生理盐水对照组(P＜0.01),与注射IGF-Ⅰ治疗组相比无显著差异(P＜ 0.05).结论:急性骨骼肌钝挫伤修复过程中,注射活血生肌类中药能有效地促进Ⅱb型MHC mRNA表达,减少Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达,并促使Ⅰ型胶原mRNA水平迅速恢复到正常水平.
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活血止痛膏对兔骨骼肌急性钝挫伤后内源性Ⅱb型MHC、Ⅰ型及Ⅲ型胶原mRNA表达的影响
目的:通过应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分析内源性Ⅱb型MHC、Ⅰ型及Ⅲ型胶原mRNA的表达来探讨活血止痛膏剂对骨骼肌钝挫伤修复的作用及其可能机制.方法:用63只大白兔随机分为活血止痛膏高剂量组、中剂量组、低剂量组、青鹏膏对照组、外伤对照组,每组12只,另取3只做正常对照组.采用“重物自由落体打击法”制作大白兔骨骼肌急性钝挫伤模型.分别在3天、10天、20天、27天处死大白兔,每组每个时间点处死3只兔子,每只兔子在两条后腿腓肠肌取标本,共计6个标本.结果:(1) RT-PCR技术检测内源性Ⅱb型MHC mRNA,第3、10、20天高、中剂量组和青鹏膏组内源性Ⅱb型MHC mRNA表达量高于外伤组、低剂量组(P＜0.05)；第10、20天高剂量组对内源性Ⅱb型MHC mRNA表达高于中剂量组(P ＜0.05)；(2)RT-PCR技术检测内源性Ⅰ型胶原mRNA的表达量:第3天各组比较没有统计学意义；第10、20天高、中剂量组和青鹏膏组表达量低于外伤组、低剂量组(P＜0.05)；第10、20天高剂量组优于中剂量组(P＜0.05).(3) RT-PCR技术检测内源性Ⅲ型胶原mRNA的表达量:第3、10、20天高、中剂量组和青鹏膏组内源性Ⅲ型胶原mRNA表达低于外伤组、低剂量组(P＜0.05)；第3、10、20天高剂量组和青鹏膏组对内源性Ⅲ型胶原mRNA表达量明显少于中剂量组(P＜0.05).3个检测指标各个时间点青鹏膏组和高剂量组比较无统计学意义(P＞0.05),即作用效果没有差别.结论:(1)活血止痛膏可有效的促进骨骼肌急性钝挫伤后Ⅱb型MHC的mRNA表达的提高.(2)活血止痛膏能促进骨骼肌急性钝挫伤后Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的减少.(3)活血止痛膏可通过促进Ⅱb型MHC mRNA的表达,同时减少Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达提高骨骼肌愈合质量.(4)高剂量活血止痛膏与青鹏膏在骨骼肌Ⅱb型MHC mRNA表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达效果相当.
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轻揉推拿法对兔骨骼肌急性钝挫伤后肌球蛋白重链和胶原表达的影响
目的 通过应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分析内源性Ⅱb型肌球蛋白重链及Ⅲ型胶原mRNA的表达来探讨轻柔推拿法对骨骼肌钝挫伤修复的作用及其可能机制.方法 27只实验兔中24只实施后腿腓肠肌自由落体致伤,建立实验模型后分为推拿组、外伤对照组,每组12只,另取3只作为正常对照组.采用"重物自由落体致伤法"制作大白兔骨骼肌急性钝挫伤模型.分别在3d、10d、20d、27d处死大白兔,每组每个时间点处死3只兔子,每只兔子在两条后腿腓肠肌取标本,共计6个标本.结果 RT-PCR技术检测内源性Ⅱb型主要组织相容性复合体(MHC) mRNA,第3天推拿组与外伤组比较差异无统计学意义(P＞0.05),第10天推拿组与外伤组比较差异有统计学意义(P＜0.05),第20天、27天推拿组表达量比外伤组表达高(P＜0.05).RT-PCR技术检测内源性Ⅰ型胶原mRNA的表达量:第3天、10天外伤组与推拿组比较差异无统计学意义(P＞0.05).第20天推拿组表达量低于外伤组(P＜0.05).RT-PCR技术检测内源性Ⅲ型胶原mRNA的表达量:第3天推拿组与外伤组比较差异无统计学意义(P＞0.05),第10天、20天、27天推拿组表达量低于外伤组(P＜0.05).结论 轻揉推拿法在骨骼肌急性钝挫伤修复中晚期能有效促进Ⅱb型MHC内源性mRNA表达升高,从而促进新骨骼肌生成.轻揉推拿法在骨骼肌急性钝挫伤修复中晚期能有效降低Ⅰ及Ⅲ型胶原内源性mRNA过高表达,从而减缓骨骼肌内纤维化过程的发生,改善骨骼肌愈合质量.
